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Mathematical-model-assisted analysis of root growth using microscope images 利用显微镜图像对根系生长进行数学模型辅助分析
Plant Morphology Pub Date : 1900-01-01 DOI: 10.5685/PLMORPHOL.25.67
A. Iwamoto, M. Sugiyama
{"title":"Mathematical-model-assisted analysis of root growth using microscope images","authors":"A. Iwamoto, M. Sugiyama","doi":"10.5685/PLMORPHOL.25.67","DOIUrl":"https://doi.org/10.5685/PLMORPHOL.25.67","url":null,"abstract":"67 はじめに 植物の成長は根本的には茎頂と根端という2つの軸の先端 成長に還元することができ, 植物の器官における形態形成も, 基本的にはこの先端成長の調節によって支えられていると言え る (岩元 2008). 植物の先端成長の一方である根端の成長は, 最先端部の分裂域における活発な細胞増殖と, それに続く伸 長域における細胞体積の増大(=体積増大) とを特徴とする (Beemster et al. 2003). 遺伝 ・ 環境要因による根の成長の違 いは, この2つの側面の変化によるが, それらは独立ではなく 互いに密接に関連している. 根端成長を構成するこれらの各 側面の空間プロファイルを明らかにし, 両者の複合的な関係 を解明することは, 先端成長の制御のあり方, さらに遺伝 ・ 環 境要因による成長の変化の本質を理解する上できわめて重要 である. 成長中の器官から体積増大と細胞増殖の詳細なデータを 取得するをためには, 細胞動力学的手法(“cell flux” -based kinematic analysis)による解析が有効である. 細胞動力学的手 法とは, 生理学的な前提を特に置かず, 器官の成長を物理 的な「細胞の流れ」として捉えて解析することで, 器官の体積 増大と細胞増殖を定量化する手法である (Gandar 1983) . 根端 成長に対して細胞動力学的手法を適用することで, 成長の各 側面に関する空間プロファイルを得ることができる. この手法は 特に一次元的な成長をする根端成長の解析に有効であり, 実 際にこの手法を用いて, シロイヌナズナ根端における皮層細 胞と表皮細胞の成長の違い(Beemster and Baskin 1998),オー キシンが与える影響(Beemster and Baskin 2000, Swarup et al. 2005, Rahman et al. 2007) , 塩ストレスが及ぼす影響 (West et al. 2004) ,倍数体を含めたエコタイプ間の成長の違い (Iwamoto et al. 2006) , エチレンが与える影響(Swarup et al. 2007)など の定量的解析が行われている. Plant Morphology vol. 25 pp. 67-71 INVITED REVIEW","PeriodicalId":279979,"journal":{"name":"Plant Morphology","volume":"10 1","pages":"0"},"PeriodicalIF":0.0,"publicationDate":"1900-01-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"116711856","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":0,"RegionCategory":"","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
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Regulation of intracellular transport of the glutelin in the rice endosperm cell 水稻胚乳细胞内谷蛋白运输的调控
Plant Morphology Pub Date : 1900-01-01 DOI: 10.5685/plmorphol.31.31
Masako Fukuda, T. Kumamaru
{"title":"Regulation of intracellular transport of the glutelin in the rice endosperm cell","authors":"Masako Fukuda, T. Kumamaru","doi":"10.5685/plmorphol.31.31","DOIUrl":"https://doi.org/10.5685/plmorphol.31.31","url":null,"abstract":"31 はじめに コメ貯蔵タンパク質は溶媒溶解性に基づきグルテリン, プロラミン,グロブリンに分類される.グルテリンは酸・ 塩基可溶性で,貯蔵タンパク質の約60%を占める.アル コール可溶性であるプロラミンは約20%,塩可溶性であ るグロブリンが10%を占める.これら3種類の貯蔵タンパ ク質は粗面小胞体上で合成され,小胞体内腔に転送され る.小胞体内腔に転送されたプロラミンはそのまま小胞体 内で凝集し,PBIを形成する.一方,グルテリンは,粗面 小胞体上で前駆体型として合成され,小胞体内腔に転送さ れた後,前駆体のまま小胞体からゴルジ体を経由し,貯蔵 型液胞へと輸送される.グルテリン前駆体は貯蔵型液胞内 で2つのサブユニットに開裂し,成熟型グルテリンとして PBIIを形成する.グロブリンはグルテリンと同様,小胞 体上で合成され,グルテリンと共に貯蔵型液胞(PBII)内 に蓄積する. グルテリンは小胞体で合成後,貯蔵型液胞へと輸送,蓄 積することから,各オルガネラに輸送・蓄積に機能する因 子の存在が考えられた.これらの因子を明らかにするため に,グルテリン前駆体を高蓄積する変異体に着目した.グ ルテリンは前駆体型として合成され輸送されることから, これら因子に機能阻害が生じた際に同前駆体が高蓄積する PLANT MORPHOLOGY vol. 31 pp. 31-35 INVITED REVIEW","PeriodicalId":279979,"journal":{"name":"Plant Morphology","volume":"15 1","pages":"0"},"PeriodicalIF":0.0,"publicationDate":"1900-01-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"116637098","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":0,"RegionCategory":"","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
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極微小デバイスを用いた生体分子・細胞・組織の顕微操作と解析 利用极微小设备对生物分子、细胞、组织进行显微操作和分析
Plant Morphology Pub Date : 1900-01-01 DOI: 10.5685/PLMORPHOL.25.61
英之 新田, 哲也 東山
{"title":"極微小デバイスを用いた生体分子・細胞・組織の顕微操作と解析","authors":"英之 新田, 哲也 東山","doi":"10.5685/PLMORPHOL.25.61","DOIUrl":"https://doi.org/10.5685/PLMORPHOL.25.61","url":null,"abstract":"61 はじめに 生命科学におけるブレークスルーは, しばしば新しい観察・ 計測技術の発明や発展によりもたらされてきた. 16世紀末に 発明された光学顕微鏡は17世紀には細胞の発見を初め, 生 物学, 医学, 物理学に革命をもたらし, 現在ではその精度 の向上と多様化により, 蛍光顕微鏡によるモータ蛋白質の機 械的挙動一分子イメージング(Noji et al. 1997, Kitamura et al. 1999)や, 生きた細胞内の一分子モニタリングも可能となった (Luo et al. 2012). また, 二光子顕微鏡では胚細胞内の個別 の細胞核を明確に識別することができ, 生きたままの組織や細 胞内部を三次元で観察するライブイメージングの分野でも強力 なツールとなっている(Kurihara et al. 2013). このように, 観察 する「目」にあたる顕微鏡技術の進展は目覚ましいが, 顕微鏡 観察下で細胞や分子を自由自在に操作 ・ 解析する「手」に相 当する技術に関しては, 多くの課題が残されている. 植物試 料を含む多くの生体試料の観察は, 通常ガラス基板上に無作 為に配置,または固定して顕微鏡観察を行っている. そのため, 観察中試料を任意の位置, 方向, 角度に高精度で配向, ま たは操作したり, 外部から高い位置精度で刺激を与えその応 答を観察することは困難であった. サブミクロンのスケールで 微細な構造物を製作できるMEMS(Micro Electro Mechanical Systems) (Trimmer 1997, Judy 2001)に代表される微細加工技 術では, 細胞と同程度のスケールで「手」を製作することが可 能であり, これまで細胞, 蛋白質, 核酸などのハンドリングや 分析に応用されてきた(Arata et al. 2008a). マイクロスケールにおける微細加工技術の代表ともいえる MEMS技術は, 半導体微細加工技術を応用してマイクロメー トル (10 m) スケールからサブマイクロメートルスケールの構造 物を, 主にシリコン基板上に製作する技術である. 微小化す ることにより高感度, 高応答速度のデバイスを実現できるため, MEMS技術は微小センサ, アクチュエータ(動力源), 微小リ アクタ, 無線デバイス, 光スイッチなどに応用されてきた. 一 方で, 主にMEMS技術を用いて複数の化学プロセスをチップ 状で行うマイクロTAS (Micro-Total-Analysis-Systems)(Reyes et al. 2002, Auroux et al. 2002)では極微量のサンプルで化学・ 生化学分析が可能である. 微小空間で微量の液体を扱うため, Plant Morphology vol. 25 pp. 61-66 INVITED REVIEW","PeriodicalId":279979,"journal":{"name":"Plant Morphology","volume":"2 1","pages":"0"},"PeriodicalIF":0.0,"publicationDate":"1900-01-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"115519374","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":0,"RegionCategory":"","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
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Toward elucidating the mechanisms that regulate heterophylly 探讨异叶性调控机制
Plant Morphology Pub Date : 1900-01-01 DOI: 10.5685/PLMORPHOL.24.57
Hokuto Nakayama, N. Nakayama, Akiko M. Nakamasu, N. Sinha, S. Kimura
{"title":"Toward elucidating the mechanisms that regulate heterophylly","authors":"Hokuto Nakayama, N. Nakayama, Akiko M. Nakamasu, N. Sinha, S. Kimura","doi":"10.5685/PLMORPHOL.24.57","DOIUrl":"https://doi.org/10.5685/PLMORPHOL.24.57","url":null,"abstract":"Introduction The leaves of plants show tremendous variation in size and shape, despite all leaf primordia initially developing as simple protrusions from the flanks of the shoot apical meristem (Tsukaya 2006). Aside from variation among species, some species show abrupt changes in leaf form in response to surrounding environmental conditions. This phenomenon is termed heterophylly, and it is generally defined as the variation in leaf form in a single plant in response to environmental conditions (Zotz et al. 2011). Heterophylly allows us to study not only the environmental plasticity of plant development but also leaf development and regulation of leaf form. However, there is limited information on the mechanisms that regulate heterophylly, probably due to the lack of an adequate model, despite numerous morphological studies that have been conducted on this subject (Arber 1920, Bell 2008, Fassett 1957). A thorough understanding of leaf development is required to understand heterophylly. Many recent studies have contributed toward improving our knowledge of leaf development. In addition to understanding the structure and development of leaves, many genes involved in leaf morphogenesis have been isolated, and their networks have been studied in several model species (Blein et al. 2009, Ichihashi et al. 2011, Moon and Hake 2011, Szakonyi et al. 2010, Tsukaya 2006). Moreover, research on the morphological diversification of leaves during the course of evolution is also in progress. In particular, molecular mechanisms, such as those responsible for the difference between simple and compound leaves and the difference in the complexity of leaf form among related species, have been examined in several model plants and their close relatives (Hay and Tsiantis 2006, Kimura et al. 2008, Piazza et al. 2010). Furthermore, the links between phytohormones and leaf development have been examined in detail (Bilsborough et al. 2011, Braybrook and Kuhlemeier 2010, Koenig et al. 2009, Shani et al. 2010, Umehara et al. 2008). Indeed, phytohormones, particularly abscisic acid (ABA) and ethylene, are critical for heterophyllous transformation in various species (Anderson 1978, Hsu et al. 2001, Kane and Albert 1987, Kuwabara et al. 2003). Thus, it appears that the foundation has been laid toward elucidating the mechanisms of heterophylly To facilitate our investigation on heterophylly, we selected Neobeckia aquatica (Eaton) Greene as the model system. N. aquatica is an aquatic member of Brassicaceae and is closely related to the genera Rorippa and Cardamine (Les 1994). N. aquatica exhibits distinct leaf morphology, depending on the environmental conditions; it exhibits simple leaves in terrestrial environments and Plant Morphology vol. 24 pp. 57-63","PeriodicalId":279979,"journal":{"name":"Plant Morphology","volume":"40 1","pages":"0"},"PeriodicalIF":0.0,"publicationDate":"1900-01-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"115567780","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":0,"RegionCategory":"","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
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Adaptive evolution of the aquatic angiosperm Podostemaceae inferred from the enigmatic morphology 水生被子植物Podostemaceae的适应性进化
Plant Morphology Pub Date : 1900-01-01 DOI: 10.5685/PLMORPHOL.26.65
Rieko Fujinami
{"title":"Adaptive evolution of the aquatic angiosperm Podostemaceae inferred from the enigmatic morphology","authors":"Rieko Fujinami","doi":"10.5685/PLMORPHOL.26.65","DOIUrl":"https://doi.org/10.5685/PLMORPHOL.26.65","url":null,"abstract":"","PeriodicalId":279979,"journal":{"name":"Plant Morphology","volume":"18 1","pages":"0"},"PeriodicalIF":0.0,"publicationDate":"1900-01-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"114852887","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":0,"RegionCategory":"","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
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Turning points in evolutionary pathways of the plastid division 质体分裂进化路径的转折点
Plant Morphology Pub Date : 1900-01-01 DOI: 10.5685/PLMORPHOL.14.44
H. Hashimoto
{"title":"Turning points in evolutionary pathways of the plastid division","authors":"H. Hashimoto","doi":"10.5685/PLMORPHOL.14.44","DOIUrl":"https://doi.org/10.5685/PLMORPHOL.14.44","url":null,"abstract":"Summary: Cyanelles of glaucocystophytes are probably the most primitive plastid known because of their peptidoglycan content and the sequence phylogeny of cyanelle DNA. Cyanelle division involves ingrowth of the septum at the cleavage site with the inner envelope membrane invaginating at the leading edge and the outer envelope membrane invaginating behind the septum. In dividing cyanelles, a single electron-dense ring(cyanelle ring)is present on the stromal face of the inner envelope membrane at the isthmus, but no electron-dense annular structures are detectable on the outer envelope membrane. Thus a single, stromal cyanelle ring such as this is quite unique and also distinct from FtsZ rings, which are not detectable by transmission electron microscopy. These features suggest that the cyanelle division of glaucocystophytes represent an intermediate stage between cyanobacterial and plastid division. If monophyly of all plastids is true, the cyanelle ring and the homologous inner PD-ring might have evolved earlier than the outer PD-ring. In Nannochloropsis oculata(Eustigmatophyta), the outermost membrane of the secondary plastids merges with the outer membrane of the nuclear envelope, forming a Nucleus-Plastid Continuum(NPC). As the true plastids surrounded by the double envelope complete to divide, the inner nuclear envelope divides by binary fission in advance of the outer one. This allows to maintain continuity of the plastidal outermost membrane and the outer membrane of the nuclear envelope throughout the cell division cycle. Finally the closed sac composed of the plastidal outermost membrane and the nuclear outer envelope membrane divides into two halves, giving rise to two daughter sets of the NPC. The NPC may have evolved during the establishment of the eukaryote-eukaryote endosymbiogenesis as a mechanism for division and partitioning of the secondary plastids under control of the secondary host nucleus.","PeriodicalId":279979,"journal":{"name":"Plant Morphology","volume":"126 1","pages":"0"},"PeriodicalIF":0.0,"publicationDate":"1900-01-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"114907623","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":0,"RegionCategory":"","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
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Identification of Holliday junction resolvases crucial for the chloroplast nucleoid morphology and segregation Holliday结分解酶的鉴定对叶绿体的类核形态和分离至关重要
Plant Morphology Pub Date : 1900-01-01 DOI: 10.5685/PLMORPHOL.30.73
Yusuke Kobayashi, O. Misumi, Y. Nishimura
{"title":"Identification of Holliday junction resolvases crucial for the chloroplast nucleoid morphology and segregation","authors":"Yusuke Kobayashi, O. Misumi, Y. Nishimura","doi":"10.5685/PLMORPHOL.30.73","DOIUrl":"https://doi.org/10.5685/PLMORPHOL.30.73","url":null,"abstract":"73 はじめに 藻類や植物の葉緑体は光合成によって酸素や有機物を生産 することで地球上のほぼ全ての生命活動を支えている.葉 緑体は12億年以上前に真核細胞内に共生したシアノバクテ リアを起源にすると考えられ,独自のゲノム(葉緑体DNA) 及び遺伝子発現系を有する(Gray 1992, Simpson and Stern 2002, Archibald 2015).葉緑体ゲノムサイズはシアノバク テリアゲノムサイズの10%程度まで縮退しているが,葉緑 体ゲノムは光合成や葉緑体新生に欠かせない遺伝子をコー ドしており,藻類や植物の生育に必須である(Allen 2003, Timmis et al. 2004, Stern et al. 2010).一般的に,一つの葉 緑体には相同な葉緑体DNAが約100コピー含まれており, 一細胞当たり数十の葉緑体を含む陸上植物細胞では, 一細 胞が数千コピーの葉緑体DNAを有する事になる(Kuroiwa 1991).この大量の葉緑体DNAはストロマを裸で浮遊する のではなく,様々なタンパク質と相互作用することで葉 緑体核様体構造を形成する(Kuroiwa 1991, Sato et al. 1999, Kobayashi et al. 2002, Sakai et al. 2004, Karcher et al. 2009). 葉緑体核様体は,蛍光顕微鏡とDAPIやSYBR Green Iなど によるDNA蛍光染色法の開発により1980年代に可視化され た(Kuroiwa 1991).近年の陸上植物の葉緑体核様体のプロ テオーム解析の結果は,葉緑体核様体が葉緑体DNA複製, 修復,転写,遺伝の中枢,即ち葉緑体における染色体様構 造であることを示唆している(Pfalz et al. 2006, Krupinska et al. 2013, Pfalz and Pfannschmidt 2013). 顕微鏡下では葉緑体核様体は藻類・植物種間で同じよう な小さな輝点として観察される.しかし,葉緑体核様体を 構成するタンパク質は,藻類から植物に進化する際に共生 PLANT MORPHOLOGY vol. 30 pp. 73-81 INVITED REVIEW","PeriodicalId":279979,"journal":{"name":"Plant Morphology","volume":"9 1","pages":"0"},"PeriodicalIF":0.0,"publicationDate":"1900-01-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"127549876","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":0,"RegionCategory":"","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
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Presence of DNA in the pyrenoid matrix of the siphonous green alga, Caulerpa okamurae Web.v.Bos. 虹吸绿藻(Caulerpa okamurae Web.v.Bos.)核蛋白基质中DNA的存在。
Plant Morphology Pub Date : 1900-01-01 DOI: 10.5685/PLMORPHOL.1.19
S. Miyamura, T. Hori
{"title":"Presence of DNA in the pyrenoid matrix of the siphonous green alga, Caulerpa okamurae Web.v.Bos.","authors":"S. Miyamura, T. Hori","doi":"10.5685/PLMORPHOL.1.19","DOIUrl":"https://doi.org/10.5685/PLMORPHOL.1.19","url":null,"abstract":"The specific localization and unique shape of the chloroplast nucleoid(ct-nucleoid)in the pyrenoid of C. okamurae Web. v. Bos. were revealed by fluorescence microscopy after staining with the DNA specific fluorochrome 4'6-diamidino-2-phenylindole(DAPI).","PeriodicalId":279979,"journal":{"name":"Plant Morphology","volume":"17 1","pages":"0"},"PeriodicalIF":0.0,"publicationDate":"1900-01-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"125253447","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":0,"RegionCategory":"","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
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Development of high resolution TEM image acquisition system by using high-pressure freezing method 高压冻结法高分辨率瞬变电磁法图像采集系统的研制
Plant Morphology Pub Date : 1900-01-01 DOI: 10.5685/PLMORPHOL.26.3
K. Toyooka, Mayuko Sato, N. Kutsuna, N. Nagata
{"title":"Development of high resolution TEM image acquisition system by using high-pressure freezing method","authors":"K. Toyooka, Mayuko Sato, N. Kutsuna, N. Nagata","doi":"10.5685/PLMORPHOL.26.3","DOIUrl":"https://doi.org/10.5685/PLMORPHOL.26.3","url":null,"abstract":"3 はじめに 共焦点レーザー蛍光顕微鏡など光学顕微鏡機器の急速 な発達と,蛍光タンパク質や蛍光試薬などによる蛍光ライ ブイメージング技術の発展により,細胞小器官・分子の動 態や局在,タンパク質の発現部位を容易に推定できるよう になった.例えば植物細胞では,ミトコンドリアの融合・分 裂(Arimura et al. 2004),小胞体由来のERボディ(Yamada et al. 2008),ゴルジ装置の動態(Kitajima et al. 2009)やゴル ジ体由来の小胞クラスター(Toyooka et al. 2009)など次々と 明らかになって来ている.さらに近年では,STEDやSIM, PALMなど超解像光学顕微鏡の開発により,XY軸の空間分 解能が数十nmの蛍光イメージングができるようになってき た(Schermelleh et al. 2010).しかし,各組織・細胞にどのよ うな形態のオルガネラが存在し,どのような状態で分布して いるか,超微形態レベルでの実体を知るには,蛍光イメージ ングだけでは未だ不明瞭であり,透過電子顕微鏡 (TEM)に よる観察が必須である. これまで筆者らは,植物の様々な器官・組織の超微形態 観察を多数行ってきた.その際,常に問題になる点として, 野生型各組織における組織全体にわたった超微細構造の報 告が少ないこと,加えて,組織ごとに細胞やオルガネラの超 微形態が異なることが挙げられる.それ故,組織間・細胞間 の超微細構造の比較,野生型と変異型とのオルガネラの比 較は難しく,注意が必要である.また,筆者らは組織を数十 ミリ秒で凍結固定ができる高圧凍結技法を取り入れたTEM 解析法の技術改良を進めながら,様々な植物組織を観察し てきた.細胞内のオルガネラ分布の微細構造解析を行った 結果,各器官や組織の細胞ごとにゴルジ体や多胞体などオ ルガネラの分布や超微形態も大きく異なっていた.以上の理 由から,網羅的にオルガネラの超微細構造を撮影し,器官 や組織ごとに解析するシステムの必要性を感じていた. TEMは,2000年代初頭から今日に掛けて記録媒体がフィ ルムからデジタルへ変貌し,スロースキャンCCDカメラによ り電子線透過像をデジタルデータとして容易に保存できる Plant Morphology vol. 26 pp 3-8 INVITED REVIEW","PeriodicalId":279979,"journal":{"name":"Plant Morphology","volume":"65 1","pages":"0"},"PeriodicalIF":0.0,"publicationDate":"1900-01-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"126611177","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":0,"RegionCategory":"","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
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Two-photon spinning disk confocal microscopy of living cells and tissues 活细胞和组织的双光子自旋盘共聚焦显微镜
Plant Morphology Pub Date : 1900-01-01 DOI: 10.5685/PLMORPHOL.27.27
T. Murata, Kohei Otomo, Terumasa Hibi, Hiroshi Nakayama, T. Nemoto, M. Hasebe
{"title":"Two-photon spinning disk confocal microscopy of living cells and tissues","authors":"T. Murata, Kohei Otomo, Terumasa Hibi, Hiroshi Nakayama, T. Nemoto, M. Hasebe","doi":"10.5685/PLMORPHOL.27.27","DOIUrl":"https://doi.org/10.5685/PLMORPHOL.27.27","url":null,"abstract":"2光子顕微鏡 2光子顕微鏡は蛍光顕微鏡の一種で,2光子励起過程を 利用し,蛍光標識した試料の光学断層像を撮影する.2光 子励起過程は2個の光子が同時に1分子の蛍光物質に吸収 されたときに起こる現象である.励起時に蛍光物質が遷移 する準位は通常の1光子吸収の場合と同じであるため,吸 収される光子の1個あたりのエネルギーは1光子励起の場 合の約2分の1(約2倍の波長)である.また,2つの光子の 同時吸収が必須であるため,2光子励起は光子密度の2乗 の確率で生じる.従って,励起光の集束した対物レンズの 焦点面でのみ,蛍光分子が励起され,結果として光学断層 像が得られる. 通常の励起法(1光子励起)では,共焦点顕微鏡,普通の 蛍光顕微鏡(全視野蛍光顕微鏡)ともに,励起光が透過す る光路全体で蛍光分子が励起される.共焦点顕微鏡で焦点 面だけの光学切片が得られるのは,非焦点面で発生する蛍 光や散乱された蛍光光子を除去するために,共焦点ピンホー ルを使っているためである(Conchello et al. 2005).このよ うに2光子顕微鏡によって得られる蛍光断層像は共焦点顕 微鏡で得られるものとほぼ同等であるが,それらの原理は まったく異なる. 2光子励起では,通常の蛍光標識に用いる緑色蛍光タン パク質(GFP)は約900 nmの近赤外光で励起される(図1). 近赤外光は可視光に比べて生物組織に吸収,散乱されに くいため(Ritz et al. 2001),2光子顕微鏡では組織の深部が 観察できる.この特長を生かし,2光子顕微鏡は脳深部の イメージングなどに用いられてきた(Svoboda and Yasuda 2006, Kawakami et al. 2013).植物組織における2光子顕微 鏡の使用例は少ないが,植物組織でも共焦点顕微鏡に比 べて深部観察能力が高いことが示されている(Mizuta et al. 2015).そのため,多細胞組織の内部の細胞や,単細胞で Plant Morphology vol. 27 pp 27-32 INVITED REVIEW","PeriodicalId":279979,"journal":{"name":"Plant Morphology","volume":"7 1","pages":"0"},"PeriodicalIF":0.0,"publicationDate":"1900-01-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"128136020","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":0,"RegionCategory":"","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
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