文章摘要
本文通过计算机辅助设计定向进化技术,对褐藻胶裂解酶Alya1进行分子改造,成功构建20个突变体,获得三个酶活力显著提升的单点突变体S189L、S244Q和D408W,其中S189L比活力提升约2.37倍。酶学性质表明,S189L在20-35℃下热稳定性显著增强,D408W最适pH值变为4.0,展现出耐酸性。利用该酶解产物褐藻寡糖(AOS)进行体外细胞实验和斑马鱼急性高尿酸血症(HUA)模型评估,发现AOS在1,000 μg/mL剂量下对RAW264.7细胞和HK-2细胞无毒性,并能有效降低HUA斑马鱼体内ROS水平、MDA含量和肾脏代谢指标(UA、BUN、CRE、XO)。机制研究表明,AOS通过上调HPRT1和OAT1基因促进嘌呤再利用和UA排泄,GOS则进一步激活UOX促进UA分解。研究为开发高效褐藻胶裂解酶及功能性寡糖食品配料的制备提供了理论基础和工具。
本站注明稿件来源为其他媒体的文/图等稿件均为转载稿,本站转载出于非商业性的教育和科研之目的,并不意味着赞同其观点或证实其内容的真实性。如转载稿涉及版权等问题,请作者速来电或来函联系。