Nat. Chem. Biol. | 基于引导编辑的高效精确基因组 DNA 倒置技术（PIE）

本文背景聚焦于基因组结构变异研究中染色体倒置工程化改造的技术瓶颈，现有CRISPR-Cas系统存在效率低和精确性不足等问题。研究目的是开发基于引导编辑的增强型基因组倒置技术PIE，通过优化pegRNA设计和载体构建实现从千碱基到染色体尺度的高效精确倒置。研究结论表明PIEv3b变体在多种哺乳动物细胞中实现最高61.7%的1Mb片段倒置效率，通过全基因组测序验证倒置区域无拷贝数变异，且成功应用于血友病基因倒置矫正和染色体形态重构，为疾病建模和三维基因组研究提供了新工具。