JACS|肽基天冬酰连接酶介导的非Asx肽键上的正交连接，实现D肽环化和抗体双重标记

背景：肽酰天冬酰胺连接酶（PALs）是生物制药中高效的蛋白修饰工具，但传统方法依赖Asx位点且反应可逆，限制了应用。研究目的：新加坡南洋理工大学团队旨在开发一种基于肽酰硫烷乙酰胺底物的新策略，实现PAL酶介导的非Asx位点不可逆连接，以克服传统局限。结论：该研究成功利用VyPAL2等酶在中性至弱碱性条件下高效催化反应，产率超95%，实现了非Asx肽键的不可逆形成，支持D肽环化（活性与天然L型相当）和蛋白的精准修饰，并突破性地应用于双载药ADC的制备（如曲妥珠单抗改造），对HER2高表达细胞显示出优异靶向性和低IC₅₀，为环肽药物合成和ADC开发提供了创新工具。