文章摘要
背景:胞外收缩注射系统(如Photorhabdus virulence cassette, PVC)是一种天然细菌纳米注射器,能将蛋白质递送至靶细胞,但可编程RNA递送一直是未解决的技术瓶颈。研究目的:西北农林科技大学冯宪超教授团队旨在通过工程化改造PVC,开发一种可重编程、能装载并递送多种RNA货物的新型平台DART(PVC Docker-based All-purpose RNA Injection Delivery Tool),并探索其在CRISPR-Cas基因编辑中的应用。结论:研究成功将U1A RNA结合元件引入PVC内腔,构建了DART平台,实现了Pepper RNA、siRNA、miRNA、mRNA及guide RNA等多种RNA的管腔内装载、保护与递送,突破了PVC仅限蛋白质递送的限制。DART与Cas9体系协同作用,在细胞和小鼠组织中成功敲除EGFP、KRAS和PD-L1等基因,证明其在RNA引导型基因编辑递送中的可行性。该平台具有模块化、可生物制备和低成本特点,为细胞工程、食品生物制造、精准靶向杀菌及细胞培养肉种子细胞改造提供了新型非病毒递送工具。
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