Anal.Chem.|通过综合方法揭示高度糖基化促红细胞生成素药物的准确位点特异性N -和O-糖基化

本文研究了高度糖基化促红细胞生成素（hyperEPO）药物的位点特异性N-和O-糖基化。糖基化是影响蛋白质药物疗效和安全性的关键因素，但高度糖基化蛋白的复杂结构给传统分析方法带来挑战。研究者开发了一种集成工作流程，结合游离寡糖分析和糖肽水平研究，构建高精度糖链数据库，并优化非特异性酶消化方案。通过该方法，研究者首次揭示了hyperEPO蛋白的位点特异性糖基化谱，发现EPO-XL和darbepoetin alfa在糖基化组成上的差异，并鉴定出EPO-XL中一个新的O-糖基化位点Ser120。该研究为高度糖基化蛋白的精准表征提供了有效手段，对糖基化质量控制和药物设计具有重要意义。