Anal. Chem. | 靶向酪氨酸/赖氨酸残基的新型交联剂

本文介绍了一种新型的靶向酪氨酸和赖氨酸的MS可切割交联剂，用于蛋白质结构的解析。背景方面，化学交联质谱（XL-MS）是研究蛋白质结构和蛋白质-蛋白质相互作用的重要技术，但现有的交联剂主要针对赖氨酸，对酪氨酸的捕获效果较差。研究目的是开发两种新型交联剂SBT和SCT，分别通过电化学氧化激活尿唑基团和引入NHS基团，以提高对酪氨酸和赖氨酸的交联效率。实验结果表明，这两种交联剂在肽段和蛋白质中均表现出良好的活性，特别是在BSA中通过联合使用胰蛋白酶和胃蛋白酶，显著提高了交联鉴定效率。此外，通过AlphaFold3.0生成的BSA模型与交联数据高度一致，表明BSA在溶液中可能主要以模型I的形式存在。结论上，该研究首次报道了靶向酪氨酸的MS可切割交联剂，为蛋白质复合物结构解析提供了新的工具。