ACS Chem. Biol. | 靶向OTUB1的共价多肽探针

本文背景聚焦于泛素化作为关键的翻译后修饰及其调控酶——去泛素化酶（DUBs），特别是半胱氨酸蛋白酶类DUB OTUB1，它选择性切割K48连接的泛素链，是活性蛋白质分析（ABPP）的理想靶标。研究目的是开发一种合成简便、选择性高的共价多肽探针，以替代传统基于泛素蛋白的活性探针，解决后者合成困难、灵活性差的问题。作者基于OTUB1对K48泛素链的特异性识别，截取泛素片段（如A46～D60）作为识别骨架，在K48位点引入半胱氨酸反应性弹头（如乙烯基甲酯VME），并通过固相肽合成制备探针。结论表明，所得多肽探针在纯化蛋白和细胞裂解物中能特异、灵敏地标记内源OTUB1，成功实现了在保持选择性的同时简化探针合成的目标。