Nat Biotechnol | 复杂在体模型的高分辨率遗传筛选新策略—CRISPR-StAR

本文介绍了奥地利分子生物技术研究所Ulrich Elling实验室开发的一种新型高通量遗传筛选策略CRISPR-StAR。该策略结合CRISPR-Cas9系统和Cre重组酶依赖的sgRNAs开关体系，旨在解决传统2D细胞模型在细胞增殖速度、促癌基因外显率及微环境等方面的不足。CRISPR-StAR通过设置单细胞水平的内参照，有效克服了细胞异质性和遗传漂移带来的背景噪声，实现了复杂在体模型内的高分辨率高通量遗传筛选。研究结果表明，CRISPR-StAR在低覆盖度条件下效果更好，且能有效鉴定出体内特异的黑素瘤关键基因，证实了其跨物种保守性。