Anal. Chem.|利用紫外光解离进行蛋白质结构的自上而下氢-氘交换分析
李惠琳课题组
2024-11-21 07:44
文章摘要
本文介绍了利用紫外光解离(UVPD)技术进行蛋白质结构的自上而下氢-氘交换分析(HDX)的方法。传统的氢-氘交换质谱(HDX-MS)通常采用bottom-up方法,但存在碰撞诱导解离(CID)引起的H/D scrambling问题。本文通过在配备有213nm UVPD的Orbitrap Fusion Lumos Tribrid质谱仪上进行top-down HDX分析,避免了scrambling现象,提高了HDX分辨率。研究中使用肌红蛋白作为标准蛋白,通过优化数据分析软件,成功实现了残基水平的氘代值计算,并将结果映射到蛋白质的晶体结构上,验证了方法的有效性。该研究为蛋白质结构分析提供了一种新的高分辨率技术。
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