crRNA的末端化学修饰可以增强CRISPR-Cas用于即时核酸检测的性能

本文探讨了通过化学修饰CRISPR RNA（crRNA）来增强CRISPR-Cas系统在即时核酸检测（POCT）中的性能。研究重点分析了不同化学修饰对CRISPR-Cas12a系统反式切割活性的影响，发现3′端单链DNA延伸的crRNA能显著增强Cas12a的反式切割活性，而5′端延伸则无影响。此外，两端修饰的crRNA比单端修饰的更稳定。研究还结合重组酶聚合酶扩增技术（RPA）和液滴数字平台，实现了低浓度靶标DNA的检测，并开发了便携式自动化检测装置，简化了检测流程。这些发现为开发便携、低成本的CRISPR检测平台提供了新策略，有助于在资源有限地区推广应用。