NSMB | 马丽佳团队破解CRISPR 高保真编辑难题，延长sgRNA 让SuperFi-Cas9实现精准高效编辑

背景：CRISPR基因组编辑技术在生物医学领域潜力巨大，但高保真与高效率难以兼得，高保真Cas9变体常因降低脱靶风险而导致切割活性下降。研究目的：西湖实验室马丽佳、黄晶团队旨在解决高保真Cas9“精准有余、效率不足”的难题，通过探索sgRNA间隔区延长策略，恢复SuperFi-Cas9的活性。结论：研究发现，将sgRNA间隔区从20个核苷酸延长至21-22个核苷酸，可有效恢复SuperFi-Cas9的切割活性（达野生型SpCas9的97.1%），同时保持其高保真特性；冷冻电镜揭示其机制为“电荷补偿”，即延长sgRNA与RuvC结构域相互作用补偿稳定性；团队还开发了深度学习模型AIdit-SuperFi辅助设计，为基因编辑临床安全应用提供新路径。