文献分享|Nat. Commun.:基于CRISPR/Cas13a的CRISPR抗标签介导室温RNA检测技术

YaolabHNU 2025-10-22 21:34
文章摘要
本文针对CRISPR/Cas13a系统在核酸检测中依赖预扩增步骤和特定升温条件的问题,开发了一种基于CRISPR抗标签介导的室温RNA检测技术(CARRD)。研究目的旨在通过设计特异性CRISPR抗标签发夹结构,利用靶标RNA二级结构与抗标签序列抑制Cas13a反式切割活性的机制,构建无需预扩增、可在25℃室温下实现一步级联信号放大的检测体系。实验结果表明,该技术对人类免疫缺陷病毒(HIV)和丙型肝炎病毒(HCV)RNA的检测灵敏度达10 aM,较传统方法提升10000倍,并通过30份临床血浆样本验证,特异性达100%、总体准确率93.3%。结论显示,CARRD技术有效解决了传统检测的复杂性和温度限制问题,为资源有限场景的病毒检测提供了实用化工具,未来可通过优化发夹结构和开发便携平台进一步推动即时检测应用。
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