Nat. Commun. ¦识别影响Cas12a crRNA活性的关键核苷酸,用于通用光控CRISPR诊断
GeneDiscover Hub
2025-08-07 08:00
文章摘要
本文介绍了一种新型光控CRISPR检测方法,旨在解决现有技术中需要根据不同靶标单独设计和优化光控修饰位点的问题。作者通过研究发现Cas12a的crRNA的RRS区第4位点对酶活性的调控至关重要,并在该位点引入光敏保护基NPOM修饰,开发出“RRS-4光笼修饰+分裂crRNA”组合的“一锅法”检测策略。该方法不仅提高了检测的灵敏度和特异性,还简化了操作流程,降低了检测成本。实验证明,该策略可用于多种病原体的检测,灵敏度可达1aM,并且在临床样本检测中表现出与qPCR高度一致的结果。这一光控策略有望在临床诊断和基因编辑领域得到广泛应用。
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