ACS Chem. Biol. | NanoBRET平台用于检测活细胞中不同构象AKT与抑制剂的结合

本文介绍了美国阿拉巴马大学伯明翰分校William M. Marsiglia教授团队开发的一种活细胞NanoBRET检测平台，用于研究AKT抑制剂与不同构象状态AKT的结合。背景方面，AKT是PI3K-AKT信号通路的核心激酶，与癌症密切相关，但现有抑制剂在临床试验中疗效有限。研究目的是开发新方法评估不同抑制剂与AKT亚型的结合偏好性。通过将纳米荧光素酶NL融合到AKT上，利用BRET信号变化测定抑制剂结合能力。研究发现ATP竞争性抑制剂与膜定位AKT结合更强，变构调节剂对AKT3抑制较弱，并鉴定出关键残基Q79K对MK-2206结合的影响。结论表明该平台为AKT抑制剂的筛选和表征提供了新思路。