文献分享 | Angew.：利用 DNA 酶介导的单链 DNA 辅助双链 DNA 切割实现重复序列的无 PCR 定点突变

本文介绍了德克萨斯大学奥斯汀分校陆艺教授团队开发的一种无需PCR的定点突变方法，称为DANDA系统。该系统利用单链DNA辅助DNA酶切割双链DNA，实现了在含有重复序列的质粒上进行精确的定点突变。传统的PCR方法在处理重复序列时效率低下，而DANDA系统通过使用未修饰的DNA寡核苷酸，显著降低了成本并提高了效率。研究结果表明，DANDA系统具有高度可定制性和靶标特异性，成功在含PCR不兼容重复序列的质粒上产生突变。这一技术为合成生物学和基因编辑提供了新的工具，未来有望应用于活细胞基因组编辑。