Nucleic Acids Res. ¦探究激活剂的拓扑结构对CRISPR-Cas12a的反式切割活性的影响

本文研究了不同拓扑结构的激活剂对CRISPR-Cas12a反式切割活性的影响。背景方面，CRISPR-Cas12a系统因其高灵敏度和选择性在核酸检测和生物传感领域有广泛应用，但现有研究多集中于线性DNA激活剂，其低可操作性和不稳定性限制了应用。研究目的是探究线性、平面和立体拓扑结构对Cas12a反式切割活性的影响。研究发现，PAM区的结构改造会抑制反式切割活性，平面结构可增强反式切割活性，而立体框架则无抑制作用。此外，基于平面结构激活剂开发的高灵敏次氯酸检测方法，检测限达88 nM。结论表明，激活剂拓扑结构的设计原则为CRISPR-Cas12a生物传感器的开发提供了新思路。