Anal. Chem. | 利用藻酸盐基水凝胶开发自动化、超快速、自下而上的蛋白质组学工作流程

本文介绍了利用藻酸盐基水凝胶开发的一种自动化、超快速、自下而上的蛋白质组学工作流程。文章主要优化了酶切步骤，解决了传统蛋白质组学中酶存在自切割、难回收、难以分离等问题。通过使用藻酸盐水凝胶固定化酶，实现了快速便捷的酶固定化，能够在几秒内形成酶基质，并稳定至多八天。研究还评估了胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和胃蛋白酶的多酶组合，发现胃蛋白酶-胰蛋白酶双酶切在室温下1小时的效果与传统18小时的金标准方案相当，且酶活保持不变。该方法不仅提高了蛋白质组学分析的效率，还降低了成本。