所有作者均中文署名！南京大学「国家杰青」黄硕，最新Nature Nanotechnology！

该研究针对现有蛋白质测序技术（如Edman降解和质谱）存在的读长短、通量低、难以解析低丰度蛋白及翻译后修饰等局限，旨在开发一种新型高分辨纳米孔肽段感知平台。研究团队构建了镍修饰的MspA纳米孔（MspA-NTA-Ni），利用Ni²⁺与肽段N端可逆配位作用，在单分子水平成功识别了20种蛋白氨基酸、4种修饰氨基酸、32种肽段、6种修饰肽、11种生物活性肽和2种新抗原肽。结合机器学习模型，分析物的验证准确率最高达97.4%。该方法不仅支持肽段直接识别与酶解后肽段轮廓分析，还通过外肽酶和内肽酶生成重叠片段，结合事件数据库实现了参考肽序列的组装。此外，该平台对突变、缺失及翻译后修饰具有敏感性，能有效定位位点。结论表明，该纳米孔系统为蛋白质组学提供了一种高分辨率、可扩展的单分子分析工具，为未来靶向肽段表征和单分子蛋白质测序奠定了基础。