桥接重组酶可在人染色体上插入片段

背景：IS110家族丝氨酸重组酶可通过双特异性RNA向导在细菌中介导可编程DNA重组，已有研究报道在人细胞中利用IS622系统实现兆级重排。研究目的：本文旨在证明ISCro4在人类细胞中的高桥接重组酶活性，并揭示其活性增强的结构基础，同时评估其特异性和脱靶风险。结论：ISCro4通过关键氨基酸替换增强了与RNA及DNA底物的结合，能够高效实现DNA片段删除、倒位及插入，效率超过6%，且通过选择独特靶点可有效规避脱靶，为开发新一代基因组编辑工具奠定了基础。