低感染复数高效编辑枯草芽胞杆菌噬菌体

背景：噬菌体基因组工程技术的发展对噬菌体生物学研究和遗传工具开发至关重要。已有研究利用CRISPR-Cas9系统对枯草芽胞杆菌噬菌体进行基因编辑，但效率有待提高。研究目的：法国巴黎萨克雷大学Matthieu Jules团队旨在开发一种高效、快速的枯草芽胞杆菌噬菌体基因组工程方法，以提升基因敲除和插入的效率。结论：通过构建整合表达Cas9的宿主菌株，并结合极低感染复数（0.001）的条件，团队实现了使用短至40 bp同源臂仍能达到100%的基因敲除效率，并建立了名为QuickPhage的“一步法”平板筛选方案。该系统也成功用于外源基因插入和异源蛋白高效表达，且不影响噬菌体适应性，相关成果发表于ACS Synthetic Biology。