J. Am. Chem. Soc. | 基于噻蒽鎓化学的细胞内蛋白–蛋白相互作用识别方法

背景：蛋白质-蛋白质相互作用（PPIs）在细胞生命过程中至关重要，传统化学交联方法存在细胞通透性低、假阳性高或依赖紫外光等局限。研究目的：开发一种基于噻蒽鎓化学的新型交联剂TTD，实现细胞内短距离、Cys选择性的蛋白交联，以高效捕获PPIs并支持结构建模。结论：TTD试剂具有良好细胞通透性，能在单步反应中生成高反应性episulfonium中间体，实现特异性标记和富集；在HEK细胞中鉴定到大量蛋白内和蛋白间交联，短距离约束（≤23 Å）提高了PPI结构预测的准确性，并成功识别了如RACK1–Vigilin等新型相互作用，为细胞内相互作用组研究提供了高效策略。