Nat. Commun. ¦CRISPR-Cas12a通过多重引导RNA有利于反式切割而不是顺式切割，实现病原体DNA灵敏检测

背景：结核病是全球重大公共卫生问题，传统检测方法存在耗时长、设备昂贵等局限性，尤其在资源匮乏地区诊断覆盖率低。研究目的：开发一种基于CRISPR-Cas12a的新型检测技术ActCRISPR-TB LFA，通过多重引导RNA策略优化切割活性，实现无需预扩增的高灵敏度病原体检测。结论：该方法通过非经典PAM的gRNA组合有效抑制顺式切割，促进反式切割信号放大，检测灵敏度达5拷贝/μL，15分钟即可通过试纸条读取结果，临床验证显示其可检出Xpert漏诊病例，特别适用于儿童和HIV感染者的舌拭子自采样检测。