Nucleic Acids Res. |充分发挥Cas12a在核酸诊断应用中的高速反式底物切割动力学
GeneDiscover Hub
2025-09-24 09:00
文章摘要
本文背景是CRISPR-Cas12a系统在核酸诊断中具有高灵敏度,但其反式切割活性存在显著差异且原因不明。研究目的是探究影响Cas12a反式切割活性的关键因素,并提出"RNP池"策略以消除自抑制效应,实现无需预扩增的高灵敏度检测。结论表明,该策略通过协同切割将PPF片段缩短至临界长度以下,解除自抑制,显著提升催化效率和检测灵敏度至飞摩尔级别,为高灵敏度CRISPR诊断平台开发提供理论支持和技术路径。
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