Nat. Chem. Biol. | 使用基于转子的荧光氨基酸对蛋白质微环境变化进行实时成像

本文针对蛋白质微环境变化研究的技术局限性，开发了一种基于转子荧光团的非经典氨基酸标记方法。研究背景在于传统荧光蛋白标记会干扰靶蛋白功能且空间分辨率有限。研究目的是通过遗传密码子拓展技术，在蛋白质特定位点插入环境敏感型荧光氨基酸，实现对微环境粘度变化的实时监测。作者设计了三类RBF-ncAAs，其中AnapTh表现出优异的粘度和极性响应特性，并通过计算优化获得了高效氨酰tRNA合成酶。实验验证表明该方法可成功应用于蛋白质聚集、相分离等多种生物过程监测。结论表明该技术为活细胞内蛋白质局部环境变化研究提供了高时空分辨率的工具。