Nat. Chem. | 细菌E1样酶的活性优化实现了ATP驱动的蛋白及多肽C端修饰

本文介绍了基于细菌E1样酶MccB开发的ATP驱动平台，用于蛋白和多肽的C端修饰。背景方面，现有的蛋白C端生物偶联策略如转肽反应存在底物范围窄、产率受限等问题。研究目的是开发一种利用ATP驱动的腺苷酸化反应进行C端修饰的新方法。作者通过突变MccA肽库筛选出高效底物MccA-N7G，并发现硫醇亲核试剂反应效率最高。此外，作者还拓展了其他细菌中MccB蛋白的非同源底物催化活性，实现了相互正交的酶-底物对。结论上，该方法成功应用于表达蛋白连接体系，显著提高了连接效率，并在细胞表面GFP特异染色等方面展示了应用潜力。