BB.一种由CRISPR/Cas12a介导、通过原位生成点击酶催化的点击免疫分析法用于高灵敏检测旋毛虫

本研究旨在解决食品安全检测中痕量蛋白质靶标检测的挑战，提出了一种高灵敏度的CRISPR/Cas12a介导的点击免疫分析方法，用于检测肉类样品中的旋毛虫。通过将激活剂单链DNA和单克隆抗体偶联到金纳米颗粒上，引入CRISPR/Cas12a系统，并采用铜（I）催化的叠氮-炔环加成（CuAAC）反应来克服荧光定量探针的制备和储存问题。实验结果显示，该方法在3.125至100 ng/mL范围内具有线性关系，检测限为0.35 ng/mL，比传统ELISA方法低三个数量级，并能准确检测100克猪肉中的单个旋毛虫幼虫。研究结论表明，CRISPR/Cas12a系统与CuAAC反应的结合为高灵敏度荧光检测方法提供了新途径。