AC.相互激活的双指数扩增DNA机器增强稳健的CRISPR/Cas12a反馈传播用于超灵敏微小核糖核酸检测
分析化学方法
2025-07-13 18:20
文章摘要
本文介绍了一种相互激活的双指数扩增DNA机器(MADEA-DNA机器),用于超灵敏检测乳腺癌生物标志物miR-155。该系统整合了指数滚环扩增(E-RCA)和自催化增量链置换扩增(AI-SDA),通过双向激活机制实现自我强化的循环扩增。扩增产物进一步激活CRISPR/Cas12a,实现对荧光报告分子的反式切割以放大信号。该方法的检测限达到1.26 fM,动态范围为5 fM-10 nM,具有高特异性。在人血清中的验证表明,乳腺癌患者体内的miR-155水平显著高于健康供体,结果经qRT-PCR证实。该系统为乳腺癌早期诊断提供了强大的液体活检平台。
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