Nat. Chem. Biol. | 利用SNAP-tag2进行更快速明亮的蛋白质标记

本文介绍了发表在Nature Chemical Biology上的一项研究，主要针对SNAP标签及其标记底物进行工程化改造，以提高其在活细胞中的标记速度和荧光信号。研究背景是SNAP标签在生物成像中的应用受到其缓慢标记动力学和底物细胞通透性限制。研究目的是通过改造SNAP标签和标记底物，提升其在体外和活细胞中的标记效率。作者通过合成和测试多种杂环化合物和接头，最终得到新的SNAP反应底物TF-TMR，并结合定点突变、计算设计和定向进化方法改造SNAP标签，得到SNAP-tag2。实验结果表明，SNAP-tag2与TF-TMR的反应速率比传统组合提高了100倍，且在活细胞成像中表现出更高的荧光信号和分辨率。结论是SNAP-tag2及其底物的改造显著提升了蛋白质标记的效率和亮度，适用于多种生物成像应用。