AC.用于通过Cas9/开关型sgRNA复合物介导的邻近切割测定对小细胞外囊泡蛋白质进行灵敏分析的高通量芯片

本研究开发了一种高通量芯片，用于灵敏分析小细胞外囊泡（sEVs）的表面蛋白质。背景方面，sEVs在疾病诊断中具有重要潜力，因其能够运输反映母细胞特征的蛋白质。研究目的是通过固定在96孔板上的CD63抗体和整合到开关sgRNA中的CD9适配体，高效捕获sEVs并进行表面蛋白分析。该系统利用Cas9切口酶/开关sgRNA复合物和身份探针介导的邻近切割测定，结合DNA聚合酶辅助的链延伸和置换，实现对靶蛋白的高特异性和精确识别。结论显示，该方法能够以极高的灵敏度（低至3.5个颗粒/μL）分析sEVs上的表面蛋白EpCAM，并成功应用于多种生物样品的sEVs表面标志物鉴定，展示了其在生物标志物发现和分析中的巨大潜力。