AC.相互激活的双指数扩增DNA机器增强稳健的CRISPR/Cas12a反馈传播用于超灵敏微小核糖核酸检测

本文介绍了一种相互激活的双指数扩增DNA机器（MADEA - DNA机器），用于超灵敏地检测乳腺癌生物标志物miR - 155。该系统整合了指数滚环扩增（E - RCA）和自催化增量链置换扩增（AI - SDA），通过双向激活机制驱动，形成一个自我强化的循环。扩增子进一步激活CRISPR/Cas12a，实现对荧光报告分子的反式切割，以进行信号放大。MADEA - DNA机器的检测限达到1.26 fM，动态范围为5 fM - 10 nM，并且对错配和非靶标的微小RNA（miRNA）具有极高的特异性。在人血清中的验证表明，乳腺癌患者体内的miR - 155水平显著升高，这一结果得到了定量逆转录聚合酶链反应（qRT - PCR）的证实。该系统为乳腺癌早期诊断中的液体活检应用提供了一个强大的平台。