文献分享|荧光探针的逐步标记：一种用于MINFLUX成像和跟踪的一般方法

本文介绍了一种名为GLF-MINFLUX的新方法，通过逐步标记荧光探针来实现高精度的MINFLUX成像和活细胞追踪。该方法利用具有蛋白质诱导关/开切换功能的小分子荧光染料，逐步标记、定位和光漂白单个蛋白质，从而在密集细胞环境中实现纳米级成像和追踪。实验结果表明，GLF-MINFLUX在定位精度、采集效率和目标密度方面均优于传统MINFLUX技术。此外，该方法还能进行三维定位和双通道纳米级成像，并能以高时间分辨率追踪活细胞中的单个蛋白质，揭示其扩散行为和速率。GLF-MINFLUX为从分子水平研究蛋白质功能提供了一种通用且高效的工具。