文章摘要
本文背景: 碱基编辑器(BEs)是作物遗传改良的重要工具, 但基于Cas12系统的腺嘌呤碱基编辑器(ABEs)因缺乏高效切刻酶变体, 编辑效率远低于胞嘧啶碱基编辑器(CBEs), 限制了其应用。研究目的: 安徽农业大学联合安徽省农科院旨在通过融合高活性核酸酶变体与二聚化TadA-8e, 优化植物Cas12-ABE碱基编辑系统, 提升编辑效率。结论: 研究系统评估了5种LbCas12a变体, 发现HyperLbCas12a效率最高; 通过构建融合二聚体TadA-8e的HyperLb-2×TadA8e编辑器, 水稻愈伤组织中A-to-G编辑效率达33.11%, 为单体的2.20倍, 稳转植株中达80.81%, 纯合/双等位基因编辑率达41.69%。该策略还成功应用于Cas12i3系统, 并在大豆毛状根中验证了广泛适用性, 为作物遗传育种提供了高效精准的基因组编辑工具。
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