PAM远端结构重排引发CRISPR转座

本文背景聚焦于CRISPR相关转座子（CASTs），这是一类能够实现RNA引导DNA插入的Tn7样遗传元件，但其精确整合的分子机制尚不明确。研究目的是通过解析副溶血性弧菌来源的I-F3型CAST中TniQ-Cascade复合物的冷冻电镜结构，阐明Cas8/5识别原间隔序列毗邻基序（PAM）的机制以及效应器与转座蛋白的协同作用。结论表明，研究鉴定了决定PAM特异性的关键残基，揭示了系统对PAM近端错配的容忍性，并发现PAM远端正确的碱基配对会引发Cas8/5和TniQ的构象变化，导致DNA弯曲，从而将下游DNA导向转座装置。这些PAM远端的动态结构重排为理解I-F3型CAST的转座许可提供了新见解，并凸显了其在基因组工程中的应用潜力。