章永登Nature Methods丨4Pi-SIMFLUX实现全细胞三维2纳米定位精度

背景：单分子定位显微术（SMLM）是解析纳米尺度亚细胞结构的重要工具，但其轴向分辨率因光学限制而劣于横向分辨率。4Pi-SMLM技术提升了轴向分辨率，却引入了新的各向异性问题。研究目的：为克服现有技术的局限，西湖大学章永登团队旨在开发一种能实现三维各向同性高精度定位的超分辨成像方法。结论：该团队成功将SIMFLUX的条纹结构照明与4Pi-SMLM的相干探测相结合，提出了4Pi-SIMFLUX技术。该技术在全细胞内实现了2-3纳米的三维各向同性定位精度，并成功应用于解析微管、核孔复合物等精细结构，同时通过集成双色成像和深度拓展策略，实现了全细胞尺度的三维超分辨观测，为分子尺度生物学研究提供了强大工具。