Chem. Sci. | 使用内部淬灭荧光监测翻译后修饰

本文背景是翻译后修饰（PTMs）如乙酰化、甲基化等在蛋白质功能调控中至关重要，但现有定量研究方法如质谱和抗体检测存在通量低、交叉反应等问题。研究目的是开发一种基于内部猝灭荧光（IQF）和蛋白酶门控策略的高通量、特异性化学工具，以实时监测PTM酶活性。作者利用胰蛋白酶对赖氨酸/精氨酸修饰的切割特异性，结合硫氨基酸模拟物构建底物库，应用于多种酶（如SIRT3、HDAC2）的底物谱分析和相邻修饰串扰研究。结论表明，该策略能有效揭示酶活性的细微差异（如HDAC2的双向调控潜力），并为表观遗传修饰研究提供了便捷的化学生物学工具。