J. Am. Chem. Soc. | 碱诱导的N端肽测序方法

本文介绍了一种发表在JACS上的碱诱导N端肽测序方法，旨在替代传统的Edman降解法。背景方面，Edman降解法虽然经典，但在处理酸敏感肽段或含有酸敏感功能团的蛋白质时存在局限性。研究目的是开发一种新的非酸性N端肽测序方法，通过碱诱导降解实现高效测序。作者通过迭代改进降解试剂，最终选择以N-羟基琥珀酰亚胺作为离去基团、肼甲酰胺作为超亲核试剂，合成了多种N端衍生化试剂，并发现化合物DR3在肽衍生化步骤中产率最高。实验结果表明，该方法能有效移除所有20种氨基酸，且在某些特定氨基酸（如半胱氨酸和蛋氨酸）上表现出比Edman降解法更高的效率和准确性。结论方面，该方法为蛋白质测序提供了一种有价值的替代方案，特别适用于酸敏感样品和需要同时分析蛋白质与核酸的情况。