Mol Cell | 中山大学张锐Ⅲ型CRISPR技术实现RNA的剪切与编辑

本文介绍了中山大学张锐团队开发的SCISSOR技术，该技术通过工程化引导RNA（gRNA）引入凸环结构，实现了对RNA的灵活切除，突破了Ⅲ型CRISPR系统传统的6核苷酸间隔限制。研究团队设计了带有1-nt或2-nt凸环的gRNA，成功实现了7-nt、5-nt和8-nt的RNA切割，并通过延长gRNA长度和优化设计，将编辑效率提升至12%-16%。SCISSOR技术还成功应用于内源性基因PARK7和CKB的编辑，以及HEXA基因中移码突变的修复，恢复了蛋白表达和部分功能。此外，该技术可在肿瘤细胞中创建免疫原性移码多表位，为癌症治疗提供新策略。RNA-seq分析显示，SCISSOR的脱靶效应与全匹配gRNA相当，表明其具有较高的特异性。