NAR | 南京医科大学岑瑶等团队提出了FRAME用于精确和敏感地调节CRISPR/Cas12a反式切割活性
iNature
2024-09-25 11:23
文章摘要
南京医科大学岑瑶等团队在Nucleic Acids Research上发表了一项研究,提出了名为FRAME的新策略,用于精确和敏感地调节CRISPR/Cas12a的反式切割活性。该研究利用瓣内切酶1 (FEN1)来调节双链DNA激活子(FRAME)中原间隔子邻近基序(PAM)模块的可及性,通过识别靶输入与底物之间的三碱基重叠结构,选择性地裂解并释放含有“TTTN”序列的5'-flap,触发FEN1的二次裂解,同时形成缺口PAM,最终实现Cas12a活性的敏感切换。FRAME策略不仅精确地编程了Cas12a的活性,而且同时触发了等温循环扩增,构建了检测髓过氧化物酶和miR-155的传感平台,具有较高的灵敏度和特异性。该策略为调节Cas12a的活性开辟了一条新的途径,在医学诊断领域具有巨大的潜力。
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