基于新型HRP底物白藜芦醇和Ag/SiO 2 纳米粒子的酶联荧光免疫传感体系

以一种纯天然产物——白藜芦醇(resveratrol, RST)作为辣根过氧化物酶(HRP)荧光底物运用于酶联荧光免疫传感体系. RST对HRP, H 2 O 2 的荧光响应性能优于传统HRP荧光底物, 诸如对羟苯丙酸、Amplex Red和佳味醇. RST本身只有极弱的荧光, 在HRP催化下可被H 2 O 2 氧化成二聚体产物, 该二聚体在315 nm的激发光下能发射波长为462 nm的强荧光, 并且反应体系的荧光强度增加值与HRP量在一定浓度范围内成线性相关. 根据此关系和竞争型免疫定量原理, 以日本血吸虫抗体(SjAb)为模型分析对象, 建立了基于新HRP荧光底物的酶联荧光传感分析新方法. 运用制备的传感装置测定SjAb的线性范围为1.5×10 -6 ~7.3×10 -4 g/L, 检出限为1.5×10 -6 g/L, 测定浓度为5×10 -6 g/L SjAb的相对标准偏差为4.7%( n = 10). RST的二聚体产物水溶性很低, 通过该装置可将酶反应产物沉积在具Ag/SiO 2 纳米粒子的传感界面上, 利用纳米Ag/SiO 2 对产物吸附富集作用, 不仅解决了传统方法不便于测定低水溶性的产物的问题, 而且提高了分析灵敏性.