{"title":"培养基中添加血清对牛体外胚胎生产效率的影响","authors":"СИНГИНА, Г.Н., ШЕДОВА, Е.Н., ЛОПУХОВ, А.В.","doi":"10.33943/mms.2022.56.22.006","DOIUrl":null,"url":null,"abstract":"Биотехнология, направленная на получение эмбрионов in vitro (in vitro embryo production, IVP) и их трансплантацию животным-реципиентам, позволяет увеличить темпы генетического прогресса в селекции индустриальных пород крупного рогатого скота и обеспечить сохранение малочисленных пород. Повысить эффективность данной технологии можно за счет моделирования условий культивирования эмбрионов in vitro (in vitro embryo culture, IVC). В связи с этим было изучено влияние введения фетальной бычьей сыворотки (ФБС) в среду BO-IVC с 5-го дня культивирования IVP-эмбрионов на их развитие и жизнеспособность в условиях in vitro. Выделенные post mortem ооциты коров (n=250) инкубировали в среде созревания, оплодотворяли in vitro замороженно-оттаянной спермой и переносили в среду для развития эмбрионов. На 7-е сутки после оплодотворения ооцитов проводили подсчет числа эмбрионов, развившихся до стадии бластоцисты, и оценку их качества, а в конце культивирования (10-й день) определяли количество бластоцист, достигших стадии вылупления (тест на жизнеспособность). Для эмбрионального развития использовали либо только коммерческую среду BO-IVC (система 1), либо эту же среду, но с добавлением в нее с 5-го дня культивирования 5% ФБС (система 2). В системах 1 и 2 выход бластоцист на 7-е сутки культивирования был одинаковым и составлял 34,5±2,8 и 30,4±1,0%, а их количество, относящееся к 1 категории, — 57,7±3,5 и 65,6±5,3% соответственно. В то же время, присутствие ФБС повышало долю вылупившихся бластоцист на 10-й день культивирования с 42,7±4,7 до 70,9±3,2% (P<0,01). Сделан вывод о высокой эффективности среды BO-IVC для получения IVP-эмбрионов у крупного рогатого скота. Также очевидно, что добавление ФБС в данную среду c 5-го дня культивирования не влияет на развитие эмбрионов до стадии бластоцисты, но повышает их жизнеспособность в условиях in vitro.\n Technology of in vitro embryo production (IVP) and their transfer to recipient animals can increase the rate of genetic progress in the breeding of industrial breeds and ensure the conservation of small breeds in cattle. Efficiency of IVP technology can be increased by optimizing the in vitro embryo culture conditions (IVC). For this reason, the aim of the present research was to study effects of supplementation of fetal bovine serum (FBS) in BO-IVC medium from 5th day of bovine IVP embryos culture on their development and viability in vitro. Slaughterhouse-derived bovine oocytes (n=250) were cultured in the maturation medium, in vitro fertilized with the frozen-thawed sperm and transferred in the culture medium for embryo development. On day 7 after oocytes fertilization the number of embryos developed to the blastocyst stage (blastocyst rate) and their quality (the rate of blastocyst of Grade 1) were evaluated, and at the end of culture (day 10), the number of blastocysts that reached the hatching stage was determined. For culture of embryos, we used either commercial BO-IVC medium alone (System 1) or the same medium, but with the addition of 5% FBS from the fifth day of culture (System 2). At 7th day of culture, the blastocyst rate and the rate of blastocyst of Grade 1 were similar in both system and were for System 1 34.5±2.8 and 57.7±3.5% and for System 2 30.4±1.0 and 65.6±5.3% respectively. At the same time, the presence of FCS in BO-IVC medium increased the rate of blastocysts that hatched on day 10 of culture from 42.7±4.7 (System 1) to 70.9±3.2% (System 2) (p<0.01). It is concluded, that the BO-IVC medium is highly effective for obtaining IVP embryos in cattle. Also, it is obvious that the addition of FBS to BOIVC medium from the 5th day of culture does not affect the development of embryos to the blastocyst stage, but increases viability of obtained blastocysts.","PeriodicalId":301520,"journal":{"name":"Molochnoe i miasnoe skotovodstvo","volume":"41 1","pages":"0"},"PeriodicalIF":0.0000,"publicationDate":"2022-12-26","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":"0","resultStr":"{\"title\":\"EFFECTS OF SERUM ADDITION TO CULTURE MEDIUM ON EFFICIENCY OF PRODUCING IN VITRO EMBRYOS IN CATTLE\",\"authors\":\"СИНГИНА, Г.Н., ШЕДОВА, Е.Н., ЛОПУХОВ, А.В.\",\"doi\":\"10.33943/mms.2022.56.22.006\",\"DOIUrl\":null,\"url\":null,\"abstract\":\"Биотехнология, направленная на получение эмбрионов in vitro (in vitro embryo production, IVP) и их трансплантацию животным-реципиентам, позволяет увеличить темпы генетического прогресса в селекции индустриальных пород крупного рогатого скота и обеспечить сохранение малочисленных пород. Повысить эффективность данной технологии можно за счет моделирования условий культивирования эмбрионов in vitro (in vitro embryo culture, IVC). В связи с этим было изучено влияние введения фетальной бычьей сыворотки (ФБС) в среду BO-IVC с 5-го дня культивирования IVP-эмбрионов на их развитие и жизнеспособность в условиях in vitro. Выделенные post mortem ооциты коров (n=250) инкубировали в среде созревания, оплодотворяли in vitro замороженно-оттаянной спермой и переносили в среду для развития эмбрионов. На 7-е сутки после оплодотворения ооцитов проводили подсчет числа эмбрионов, развившихся до стадии бластоцисты, и оценку их качества, а в конце культивирования (10-й день) определяли количество бластоцист, достигших стадии вылупления (тест на жизнеспособность). Для эмбрионального развития использовали либо только коммерческую среду BO-IVC (система 1), либо эту же среду, но с добавлением в нее с 5-го дня культивирования 5% ФБС (система 2). В системах 1 и 2 выход бластоцист на 7-е сутки культивирования был одинаковым и составлял 34,5±2,8 и 30,4±1,0%, а их количество, относящееся к 1 категории, — 57,7±3,5 и 65,6±5,3% соответственно. В то же время, присутствие ФБС повышало долю вылупившихся бластоцист на 10-й день культивирования с 42,7±4,7 до 70,9±3,2% (P<0,01). Сделан вывод о высокой эффективности среды BO-IVC для получения IVP-эмбрионов у крупного рогатого скота. Также очевидно, что добавление ФБС в данную среду c 5-го дня культивирования не влияет на развитие эмбрионов до стадии бластоцисты, но повышает их жизнеспособность в условиях in vitro.\\n Technology of in vitro embryo production (IVP) and their transfer to recipient animals can increase the rate of genetic progress in the breeding of industrial breeds and ensure the conservation of small breeds in cattle. Efficiency of IVP technology can be increased by optimizing the in vitro embryo culture conditions (IVC). For this reason, the aim of the present research was to study effects of supplementation of fetal bovine serum (FBS) in BO-IVC medium from 5th day of bovine IVP embryos culture on their development and viability in vitro. Slaughterhouse-derived bovine oocytes (n=250) were cultured in the maturation medium, in vitro fertilized with the frozen-thawed sperm and transferred in the culture medium for embryo development. On day 7 after oocytes fertilization the number of embryos developed to the blastocyst stage (blastocyst rate) and their quality (the rate of blastocyst of Grade 1) were evaluated, and at the end of culture (day 10), the number of blastocysts that reached the hatching stage was determined. For culture of embryos, we used either commercial BO-IVC medium alone (System 1) or the same medium, but with the addition of 5% FBS from the fifth day of culture (System 2). At 7th day of culture, the blastocyst rate and the rate of blastocyst of Grade 1 were similar in both system and were for System 1 34.5±2.8 and 57.7±3.5% and for System 2 30.4±1.0 and 65.6±5.3% respectively. At the same time, the presence of FCS in BO-IVC medium increased the rate of blastocysts that hatched on day 10 of culture from 42.7±4.7 (System 1) to 70.9±3.2% (System 2) (p<0.01). It is concluded, that the BO-IVC medium is highly effective for obtaining IVP embryos in cattle. Also, it is obvious that the addition of FBS to BOIVC medium from the 5th day of culture does not affect the development of embryos to the blastocyst stage, but increases viability of obtained blastocysts.\",\"PeriodicalId\":301520,\"journal\":{\"name\":\"Molochnoe i miasnoe skotovodstvo\",\"volume\":\"41 1\",\"pages\":\"0\"},\"PeriodicalIF\":0.0000,\"publicationDate\":\"2022-12-26\",\"publicationTypes\":\"Journal Article\",\"fieldsOfStudy\":null,\"isOpenAccess\":false,\"openAccessPdf\":\"\",\"citationCount\":\"0\",\"resultStr\":null,\"platform\":\"Semanticscholar\",\"paperid\":null,\"PeriodicalName\":\"Molochnoe i miasnoe skotovodstvo\",\"FirstCategoryId\":\"1085\",\"ListUrlMain\":\"https://doi.org/10.33943/mms.2022.56.22.006\",\"RegionNum\":0,\"RegionCategory\":null,\"ArticlePicture\":[],\"TitleCN\":null,\"AbstractTextCN\":null,\"PMCID\":null,\"EPubDate\":\"\",\"PubModel\":\"\",\"JCR\":\"\",\"JCRName\":\"\",\"Score\":null,\"Total\":0}","platform":"Semanticscholar","paperid":null,"PeriodicalName":"Molochnoe i miasnoe skotovodstvo","FirstCategoryId":"1085","ListUrlMain":"https://doi.org/10.33943/mms.2022.56.22.006","RegionNum":0,"RegionCategory":null,"ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":null,"EPubDate":"","PubModel":"","JCR":"","JCRName":"","Score":null,"Total":0}
引用次数: 0
摘要
生物技术的目标是在体外(体外embryo, IVP)中获得胚胎,并将其移植到受体动物身上,这有助于提高养殖牛的基因进步速度,并保护数量小的品种。可以通过模拟体外培养条件(体外embryo culture, IVC)来提高这项技术的效率。因此,研究了从第5天开始在BO-IVC中引入胎儿的影响,以促进它们在体外的发育和活力。牛的后mortem卵母细胞(n=250)在成熟环境中繁殖,在体外受精冷冻解冻精子,并转移到胚胎发育的环境中。卵母细胞受精后的第7天,对胚胎数量进行了计数,并对其质量进行了评估,在培养结束(第10天),确定了孵化阶段的囊胚数量(可存活性测试)。胚胎发育为使用或仅商业环境BO IVC(1),要么是环境系统,但是添加5%种植从5日起,联邦会计(2)系统1号和2号出口7号24小时培养是相同类型为13.7±2.8±1.0% 30.4%,数量1相关类别,分别为149.5±3.5和169.9±5.3%。与此同时,fbs的存在将发芽囊肿在种植的第10天从42.7 4.7增加到70.9 3.2% (P< 0.01)。我们得出的结论是,BO-IVC的高效率环境可以从牛身上提取IVP胚胎。很明显,从种植的第5天开始,在这种环境中加入f.b.s不会影响胚胎发育到囊肿阶段,但会增加它们在体外的存活能力。= =技术= =在体外embryo制作(IVP)和在工业酿造过程中引入基因工程的技术。IVP技术的影响可以通过打开体外体外文献连接(IVC)来实现。为了这个reason,牧师的研究是在第五天的bovine IVC文献文献中。= =250 = =在创造媒介中,用冰冻的火焰和在文献媒介中运输的血(n=250)。在第7天,在第7天,被任命为blastocyst职位的人,被任命为blastocyst职位的人,被任命为determined职位的人。For culture of embryos we used either商用车BO IVC medium alone (System 1) or the same medium, but with the addition of 5% FBS from the fifth day of culture (System) 2)。At第七day of culture, the blastocyst速率and the速率of blastocyst of guy oseary 1 were cases in both System and were For System 1可比±2.8 and 57.7±3.5% and For System 2 scale±1.0 and 65.6±5.3%的respectively。在萨姆时间,在BO-IVC中,从42.7 4.7(系统1)到70.2% (p。这是一个协作,这是BO-IVC medium是一个高水平的影响。Also,这是关于FBS对BOIVC媒体的依赖,从第5天到blastocyst的开发,但是被诅咒的blastocysts的影响。
EFFECTS OF SERUM ADDITION TO CULTURE MEDIUM ON EFFICIENCY OF PRODUCING IN VITRO EMBRYOS IN CATTLE
Биотехнология, направленная на получение эмбрионов in vitro (in vitro embryo production, IVP) и их трансплантацию животным-реципиентам, позволяет увеличить темпы генетического прогресса в селекции индустриальных пород крупного рогатого скота и обеспечить сохранение малочисленных пород. Повысить эффективность данной технологии можно за счет моделирования условий культивирования эмбрионов in vitro (in vitro embryo culture, IVC). В связи с этим было изучено влияние введения фетальной бычьей сыворотки (ФБС) в среду BO-IVC с 5-го дня культивирования IVP-эмбрионов на их развитие и жизнеспособность в условиях in vitro. Выделенные post mortem ооциты коров (n=250) инкубировали в среде созревания, оплодотворяли in vitro замороженно-оттаянной спермой и переносили в среду для развития эмбрионов. На 7-е сутки после оплодотворения ооцитов проводили подсчет числа эмбрионов, развившихся до стадии бластоцисты, и оценку их качества, а в конце культивирования (10-й день) определяли количество бластоцист, достигших стадии вылупления (тест на жизнеспособность). Для эмбрионального развития использовали либо только коммерческую среду BO-IVC (система 1), либо эту же среду, но с добавлением в нее с 5-го дня культивирования 5% ФБС (система 2). В системах 1 и 2 выход бластоцист на 7-е сутки культивирования был одинаковым и составлял 34,5±2,8 и 30,4±1,0%, а их количество, относящееся к 1 категории, — 57,7±3,5 и 65,6±5,3% соответственно. В то же время, присутствие ФБС повышало долю вылупившихся бластоцист на 10-й день культивирования с 42,7±4,7 до 70,9±3,2% (P<0,01). Сделан вывод о высокой эффективности среды BO-IVC для получения IVP-эмбрионов у крупного рогатого скота. Также очевидно, что добавление ФБС в данную среду c 5-го дня культивирования не влияет на развитие эмбрионов до стадии бластоцисты, но повышает их жизнеспособность в условиях in vitro.
Technology of in vitro embryo production (IVP) and their transfer to recipient animals can increase the rate of genetic progress in the breeding of industrial breeds and ensure the conservation of small breeds in cattle. Efficiency of IVP technology can be increased by optimizing the in vitro embryo culture conditions (IVC). For this reason, the aim of the present research was to study effects of supplementation of fetal bovine serum (FBS) in BO-IVC medium from 5th day of bovine IVP embryos culture on their development and viability in vitro. Slaughterhouse-derived bovine oocytes (n=250) were cultured in the maturation medium, in vitro fertilized with the frozen-thawed sperm and transferred in the culture medium for embryo development. On day 7 after oocytes fertilization the number of embryos developed to the blastocyst stage (blastocyst rate) and their quality (the rate of blastocyst of Grade 1) were evaluated, and at the end of culture (day 10), the number of blastocysts that reached the hatching stage was determined. For culture of embryos, we used either commercial BO-IVC medium alone (System 1) or the same medium, but with the addition of 5% FBS from the fifth day of culture (System 2). At 7th day of culture, the blastocyst rate and the rate of blastocyst of Grade 1 were similar in both system and were for System 1 34.5±2.8 and 57.7±3.5% and for System 2 30.4±1.0 and 65.6±5.3% respectively. At the same time, the presence of FCS in BO-IVC medium increased the rate of blastocysts that hatched on day 10 of culture from 42.7±4.7 (System 1) to 70.9±3.2% (System 2) (p<0.01). It is concluded, that the BO-IVC medium is highly effective for obtaining IVP embryos in cattle. Also, it is obvious that the addition of FBS to BOIVC medium from the 5th day of culture does not affect the development of embryos to the blastocyst stage, but increases viability of obtained blastocysts.