Fibroblastos dérmicos humanos: una posible fuente de células para la endotelización de los injertos vasculares

Lisa K. Karlsson , Johan P.E. Junker , Magnus Grenegård , Gunnar Kratz
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Abstract

Fundamento

Recientemente, se ha emprendido una intensa búsqueda con el objetivo de encontrar fuentes de células apropiadas para la fabricación de tejido vascular. En los estudios previos se ha descrito que las células con un potencial multilinaje están presentes dentro del estroma conjuntivo de la piel. En coincidencia con esta información, los datos preliminares de nuestro grupo sugieren que los fibroblastos dérmicos humanos tienen la capacidad de alterar su fenotipo hacia uno similar a la célula endotelial in vitro. Como primer paso en el uso de estas células en la fabricación de tejidos vasculares, investigamos su capacidad para formar una capa de tipo célula endotelial en una estructura in vitro. Además, estudiamos la posibilidad de sembrar fibroblastos dérmicos en una estructura y, más tarde, iniciar la inducción hacia un fenotipo de tipo célula endotelial.

Métodos

En una estructura de gelatina se sembraron células cultivadas en un medio de fibroblastos normales o en un medio de inducción endotelial. Para estudiar la organización de las células, se efectuó una tinción sistemática. La diferenciación se confirmó mediante inmunotransferencia e inmunohistoquímica con anticuerpos dirigidos contra las moléculas usadas habitualmente para identificar las células endoteliales.

Resultado y conclusión

Los datos del presente estudio respaldan que los fibroblastos dérmicos humanos diferenciados hacia células de tipo endotelial ya presentaban una similitud histológica con las células endoteliales maduras antes de la siembra, mientras que una vez sembrados e inducidos hacia la diferenciación crecen en una estructura multicapa. Sin embargo, utilizando ambas técnicas se observó la expresión de diversas moléculas de superficie, indicativa de un fenotipo endotelial. En conclusión, los resultados presentados en este estudio indican que los fibroblastos dérmicos humanos diferenciados hacia un fenotipo similar a la célula endotelial pueden ser una nueva fuente de células para la endotelización de los injertos vasculares.

人真皮成纤维细胞:血管移植内皮化细胞的可能来源
最近,人们开始了一项密集的研究,以寻找适合制造血管组织的细胞来源。在以前的研究中,已经描述了具有多谱系潜能的细胞存在于皮肤的结缔组织基质中。与此同时,我们小组的初步数据表明,人类真皮成纤维细胞有能力在体外将其表型改变为类似内皮细胞的表型。作为使用这些细胞制造血管组织的第一步,我们研究了它们在体外结构中形成内皮细胞样层的能力。此外,我们还研究了将真皮成纤维细胞植入结构的可能性,然后开始诱导内皮细胞样表型。方法在明胶结构中,将培养的细胞置于正常成纤维细胞培养基或内皮诱导培养基中。为了研究细胞的组织,进行了系统的染色。分化通过免疫转移和免疫组化得到证实,免疫组化针对通常用于识别内皮细胞的分子的抗体。结果与结论本研究的数据支持分化为内皮型细胞的人真皮成纤维细胞在播种前就已经与成熟的内皮细胞有组织学上的相似性,而一旦播种并诱导分化,它们就会在多层结构中生长。然而,使用这两种技术,观察到各种表面分子的表达,表明内皮表型。因此,我们的研究结果表明,分化为内皮细胞样表型的人真皮成纤维细胞可能是血管移植内皮化的一种新的细胞来源。
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