PHÁT HIỆN VI KHUẨN PASTEURELLA MULTOCIDA GÂY BỆNH TỤ HUYẾT TRÙNG Ở CỪU PHAN RANG BẰNG KỸ THUẬT PCR

Abstract

Tụ huyết trùng là một bệnh truyền nhiễm có thể gây thiệt hại nghiêm trọng cho chăn nuôi gia súc, gia cầm nếu không được chẩn đoán và điều trị kịp thời. Vì vậy, trong nghiên cứu này chúng tôi đã phát triển phương pháp PCR có độ nhạy, độ đặc hiệu và độ chính xác cao để phát hiện sự có mặt của vi khuẩn P. multocida, một trong những tác nhân gây bệnh tụ huyết trùng trên cừu Phan Rang. Gen KMT1 của vi khuẩn P. multocida được nhân lên bằng cặp mồi đặc hiệu FKMT1/RKMT1 ở nồng độ khoảng 104 bản sao của plasmid mang gen đích. Phản ứng PCR không bị ảnh hưởng khi có mặt DNA của một số vi khuẩn Gram âm khác như E. coli hay M. haemolytica. Đặc biệt, với phương pháp PCR, chúng tôi đã phát hiện sự có mặt của vi khuẩn P. multocida từ mẫu DNA thô thu được bằng xử lý mẫu vi khuẩn/mẫu dịch ngoáy mũi của cừu nghi nhiễm bệnh trong đệm TE chứa 0,1% TritonX-100 mà không cần tinh sạch DNA tổng số. Đây là nghiên cứu đầu tiên công bố một phương pháp xác định sự có mặt của P. multocida trên cừu Phan Rang và là cơ sở để xây dựng quy trình chẩn đoán hiệu quả nhằm góp phần kiểm soát bệnh tụ huyết trùng trên đối tượng này.