Vergleichende Untersuchungen über die Stabilität von vier fischpathogenen Viren (VHSV, PFR, SVCV, IPNV)

Abstract

Zusammenfassung Die fischpathogenen Viren (VHSV, PFR, SVCV, IPNV) erwiesen sich gegenuber chemisch physikalischen Einflussen als relativ stabil. Im Wasser (10 °C) blieb das SVCV 42, das VHSV 49, das PFR 70 und das IPNV > 231 Tage infektios. Im Teichschlamm (pH 6,79) uberlebten bei 4 °C das VHSV 10, das PFR und SVCV 42 und das IPNV mehr als 210 Tage. Im getrockneten Zustand behielten die untersuchten Viren sowohl bei 4 als auch bei 20 °C die Infektiositat fur langer als 28 Tage bei. γ-Strahlen (1000 krad) inaktivierten die behullten Viren (VHSV, PFR, SVCV) vollstandig, das IPNV nur partiell (∼ 90%). Durch UV-Strahlen (254 nm) wurden die Rhabdoviren (VHSV, PFR, SVCV) innerhalb 10 Minuten, das unbehullte IPN-Virus innerhalb 60 Minuten vollstandig inaktiviert. Methylenblau (20 mg/l), Malachitgrun (10 mg/l), Mefarol® (1%) und Kupfersulfat (100 mg/l) hatten auf die untersuchten Viren keine inaktivierenden Wirkungen. Natronlauge (2%) und Formaldehyd (3% der 40%igen Formaldehyd-losung) inaktivierten die Erreger dagegen innerhalb 5–10 Minuten vollstandig. Saure (pH 3) inaktivierte zwar das behullte Rhabdovirus VHSV innerhalb 3 Stunden, hatte aber auf die Infektiositat des unbehullten IPNV auch nach 6 Stunden keinen Einflus. Natriumhypochloritlosung inaktivierte die untersuchten Viren nur partiell unter Verwendung vertretbarer Cl2-Konzentrationen. Zur volligen Inaktivierung der Viren waren bis zu 540 mg Cl2/l und Einwirkungszeiten zwischen 2 und 20 Minuten notwendig. Danksagung Die Untersuchungen wurden aus Mitteln des Bundesministeriums fur Ernahrung, Landwirtschaft und Forsten, Bonn, finanziert. Fraulein C. Held sei fur die technische Assistenz, Fraulein van de Graaff fur die Mitarbeit bei der Durchfuhrung der Chlorbestimmung gedankt. Summary Comparative studies on the stability of four fish-pathogenic viruses (VHSV, PFR, SVCV, IPNV) The effects of environmental conditions (water, mud, drying), the action of gamma and UV irradiation as well as the influence of chemical components and disinfectants on the infectivity of VHSV, PFR, SVCV and IPNV were tested. Storage in tap water (10 °C) reduced virus titres but SVCV survived for 42, VHSV for 49, PFR for 70 and IPNV for more than 231 days. Viruses suspended in mud (pH 7,6, 4 °C) were stable for 10 (VHSV), 42 (PFR, SVCV) and for more than 210 days (IPNV). Drying of the viruses resulted in only inactivation of 1 log TCID50 and survival was not affected by dry condition for more than 28 days at 4 and 20 °C. Gamma irradiation (1000 krad) resulted in inactivation of 90% for IPNV and > 99.99% for VHSV, PFR, SVCV. Ultraviolet irradiation (254 nm) effected a 100% reduction of the infectivity of VHSV, PFR, SVCV in 10 min., of IPNV in 60 min. Methylene blue (20 mg/l), malachite green (10 mg/l) Mefarol® (1%) and copper sulphate (100 mg/l) had no effect on the viral activities of VHSV, PFR, SVCV, IPNV. NaOH (2%) and formalin (3% of the 40% formaldehyde-solution) destroyed all viruses investigated within 5–10 min. Acid (pH 3) reduced the infectivity of VHSV significantly in 3 hours but did not affect the infectivity of IPNV. In order to inactivate the viruses investigated to exposures to chlorine (Cl2) up to 540 mg/l for 2–20 min. were needed. Resume Recherches comparees sur la stabilite de quatre virus pathogenes du poisson (VHSV, PFR, SVCV, IPNV) Les virus pathogenes du poisson (VHSV, PFR, SVCV, IPNV) se sont montres relativement stables vis-a-vis de facteurs chimico-physiques. SVCV est reste infectieux dans l'eau a 10 °C durant 42 jours, VHSV 49 jours, PFR 70 jours et IPNV > 231 jours. VHSV a survecu a 4 °C dans de la boue d'etang (pH 6,79) 10 jours, PFR et SVCV 42 jours, IPNV plus de 210 jours. Les virus examines sont restes infectieux plus longtemps que 28 jours a l'etat desseche aussi bien a 4 qu'a 20 °C. Les raysons γ (1000 krad) ont inactive completement les virus encapsules (VHSV, PFR, SVCV) et partiellement (IPNV (∼ 90%). Les Rhabdovirus (VHSV, PFR, SVCV) ont ete completement inactives en 10 minutes avec des rayons UV (254 nm) et le virus non capsule IPN en 60 minutes. Le bleu de methylene (20 mg/l), le vert de malachite (10 mg/l), Mefarol® (1%) et le sulfate de cuivre (100 mg/l) n'ont pas eu d'effet d'inactivation sur les virus examines. NaOH (2%) et la formaline (3% d'une solution a 40%) ont par contre completement inactive les agents en 5–10 minutes. L'acidite (pH 3) a inactive le Rhabdovirus VHSV encapsule en 3 heures, mais n'a pas eu d'influence sur l'infectiosite d'IPNV encapsule apres 6 heures. Une solution d'hypochlorite de sodium a inactive les virus examines en utilisant partiellement en remplacement des concentrations en Cl2. Une concentration jusqu'a 540 mg Cl2/l et des temps d'action entre 2 et 20 minutes ont ete necessaires pour une inactivation complete de virus. Resumen Estudios comparados sobre la estabilidad de cuatro virus piscipatogenos (VHSV, PFR, SVCV e IPNV) Los virus piscipatogenos (VHSV, PFR, SVCV e IPNV) se mostraron como relativamente estables frente a los influjos fisicoquimicos. En el agua (10 °C) permanecio el SVCV 42 dias infeccioso, mientras que el VHSV 49, el PFR 70 y el IPNV mas de 231 dias. En el barro de la laguna (pH 6.79) sobrevivieron a 4 °C el VHSV 10 dias, el PFR y el SVCV 42 y el IPNV mas de 210 dias. Al estado desecado conservaron los virus examinados la infecciosidad tanto a 4° como a 20 °C durante mas de 28 dias. Los rayos γ (1.000 Krad) inactivaron los virus con envoltura (VHSV, PFR y SVCV) por completo, y el IPNV solo parcialmente (∼ 90%). Por medio de los rayos UV (254 nm) se inactivaron por completo los rabdovirus (VHSV, PFR y SVCV) en un plazo de 10 minutos, mientras que el virus IPN, sin envoltura, antes de 60 minutos. El azul de metileno (20 mg/l), verde de malaquita (10 mg/l), Mefarol® (1%) y sulfato de cobre (100 mg/l) no ejercieron ninguna accion inactivadora sobre los virus investigados. La lejia de hidroxido sodico (2%) y el aldehido metilico (3% de solucion de aldehido formico al 40%) inactivaron por completo los agentes etiologicos en un plazo de 5–10 minutos. El medio acido (pH 3) inactiva, eso si, el rabdovirus VHSV, provisto de envoltura, en un plazo de tres horas, pero no ejercia ningun influjo sobre la infecciosidad del IPNV, que no tiene envoltura, incluso despues de 6 horas. La solucion de hipoclorito sodico inactivaba solo parcialmente los virus examinados, empleando concentraciones admisibles de Cl2. Para la inactivacion total de los virus fueron precisos hasta 540 mg de Cl2/l y tiempos de actuacion comprendidos entre 2 y 20 minutos.