Passiver Haemagglutinationstest für Semliki-Forest-Virus

Abstract

Several methods of coupling immunoglobulins onto sheep erythrocytes have been examined with a view to demonstrate Semliki-Forest virus by use of a passive hemagglutination test. With the exception of the carbodiimid coupling reaction, most methods could be used to couple goat anti SFV IgG to erythrocytes. Best results were obtained when anti SFV goat IgG was coupled to sheep red blood cells by using 0.25% glutaraldehyde. Sheep red blood cells treated after that method could be used to identify as well as titrate SFV in any given solution. The actual mode of agglutination was made visible by electron microscopy in so far as SFV was found to form dimers of adjacent erythrocytes via a bridge formation. The passive hemagglutination offers considerable advantages compared to other methods such as the direct hemagglutination with goose erythrocytes, as formalin inactivated virus can be detected thereby. The described test therefore offers an additional approach to check the potency of inactivated togavirus vaccines.

Zusammenfassung

Verschiedene Methoden zur Kopplung von Anti-Semliki-Forest-Virus (SFV) Immunoglobulin an Hammelerythrozyten wurden im passiven Haemagglutinationstest geprüft. In der Mehrzahl der geprüften Systeme war eine wirkungsvolle Bindung an Hammelerythrozyten erreichbar. Beste Ergebnisse wurden jedoch erreicht, wenn Immunoglobuline mittels Glutaraldehyd (0,25%) an Erythrozyten gekoppelt wurden. Derart beladene Erythrozyten konnten sowohl zur Identifizierung als auch zur Titration von Semliki-Forest-Virus verwendet werden. Mit Hilfe elektronenoptischer Untersuchungen wurde die spezifische Bindung von SFV an Erythrozyten mit der Bildung von Brücken zwischen Erythrozyten sichtbar gemacht. Der passive HA-Test kann zur Erfassung von SFV aus Virussuspensionen ohne Vorbehandlung derselben Verwendung finden. Außerdem kann Formalin-inaktiviertes Virus quantitativ erfaßt werden, welches im aktiven HA-Test nicht nachweisbar ist. Dadurch eröffnet dieser Test möglicherweise einen neuen Weg zur Wirksamkeitsprüfung von Togavirusvakzinen aus inaktivierten Viren.