The effects of acute hyperglycemia on oxidative stress and nitric oxide bioavailability in platelets

Abstract

Amac: Diyabette, trombositlerin aktivasyona ve trombus olusumuna egilimi artmaktadir. Nitrik oksit (NO), ozellikle trombositten zengin trom¬buslara yeni trombositlerin katilmasini sinirlandirarak trombosit fonksi¬yonlarinda onemli rol oynar. Ancak, NO hucrelerde oksidatif/nitrozatif stresi artirarak zararli etki de gosterebilir. Bu calismada, istirahat halinde ve kollajenle uyarilmis trombositlerde akut yuksek glikozun trombosit agregasyonuna, oksidatif stres parametrelerine ve NO biyoyararlanimina etkileri arastirilmistir. Ayrica, kuersetin (superoksit anyon supurucusu) kullanilarak yuksek glikozun NO biyoyararlanimi uzerindeki etkilerinde superoksit uretiminin rolu incelenmistir. Yontemler: Yikanmis trombositler 5 mM D-glukoz (fizyolojik konsant¬rasyon, n:7) veya 25 mM D-glukoz (patofizyolojik konsantrasyon, n:7) veya kuersetin (10 μM) + 25 mM D-glukoz (n:7) ile 1 saat inkube edildi. Inkubasyon sonrasi, trombositlerde superoksit uretimi, lipid peroksidas¬yonu (LPO), NO, nitrotirozin (NT) duzeyleri ve ilerlemis glikasyon son urunleri (AGE) olculdu. Ayrica trombosit agregasyonu da incelendi. Bulgular: Dinlenme halinde ve kollajenle aktive trombositlerin yuksek glukoz ile inkubasyonu LPO, NT ve AGE duzeylerinde 5mM glukoz konsantrasyonuna gore istatistiksel olarak anlamli artislara neden oldu (p<0.05). Yuksek glukoz kollajenle aktive trombositlerde trombosit agregasyonunu, superoksit olusumunu ve NO duzeylerini anlamli olarak artirdi (p<0.05). Yuksek glukoz ile inkube edilen trombositlerde, kuer¬setin anlamli olarak NO uretiminin ve NO biyoyararlaniminin artmasina neden olurken oksidatif stresi baskiladi (p<0.05). Sonuc: Yuksek glukoz istirahat halinde ve ozellikle kollajen ile aktive trombositlerde oksidatif stresi arttirir ve NO biyoyararlanimini azaltir. Yuksek glukoz aracili superoksit uretiminin bu etkiler uzerinde rolu olabi¬lir. Bulgularimiz, diyabette trombosit-iliskili komplikasyonlarin onlenme¬sinde kuersetinin yararli etkisi olabilecegini gostermektedir.