Generación de una colonia de ratones transgénicos homocigotas K18-hACE2 para la evaluación de candidatos vacunales y terapéuticos contra el SARS-CoV-2

Fave Seccion Ciencias Agrarias Pub Date : 2022-03-04 DOI:10.14409/favecv.v20isuppl..11212

Andrea Berengeno, V. Matiller, P. Díaz, Enrique Rebelindo, F. M. Rodríguez, Ayelen Anweg, P. Silvestrini, M. Cattaneo, M. Peralta, L. Durante, U. Notaro, S. Cainelli, P. Taborda, V. Stalder, L. Etchevers, F. Rey, N. Salvetti, H. Ortega

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Abstract

EL SARS-CoV-2 es el agente etiológico responsable de la enfermedad COVID-19 que inició una pandemia desde finales de 2019. Existen distintos modelos animales para esta enfermedad siendo el modelo de ratón transgénico K18-hACE2, originalmente desarrollado para el estudio del SARS-CoV-1, de gran relevancia en el contexto actual. Considerando que los ratones se comercializan como hemicigotas y dada la ausencia de ratones homocigotas para el transgén K18-hACE2, el objetivo de este trabajo fue generar una colonia de ratones homocigotas K18-hACE2-Tg/Tg bajo condiciones ambientales controladas. Para la F1 se utilizaron 10 ratones hemicigotas (7 hembras y 3 machos), de 6-8 semanas de edad, provenientes de The Jackson Laboratory (USA). De la F1 se identificaron mediante genotipificación por PCR 78 animales: 62 hemicigotas (Tg/0) y 16 salvajes (0/0). Aquellos animales identificados como transgénicos se cruzaron con ratones C57BL/6J para seleccionar los parentales homocigotas que generaron 100% de hemicigotas en la F2. De 224 crías analizadas, se obtuvieron 7 parentales homocigotas K18-hACE2-Tg/Tg que fueron utilizados para la colonia fundación de ratones homocigotas K18-hACE2-Tg/Tg. El modelo de ratón homocigota K18-hACE2-Tg/Tg desarrollado en este trabajo podrá ser empleado para el estudio de la patogénesis de la enfermedad y la evaluación de posibles terapéuticos contra el SARS-CoV-2

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转基因纯合子小鼠K18-hACE2的生成，用于评估抗SARS-CoV-2的疫苗和治疗候选小鼠

SARS-CoV-2是2019年底开始大流行的COVID-19疾病的病原。这种疾病有不同的动物模型，转基因小鼠模型K18-hACE2，最初是为SARS-CoV-1的研究而开发的，在当前的背景下非常相关。考虑到小鼠作为半合子体销售，并且没有转基因K18-hACE2的纯合子小鼠，本研究的目的是在受控环境条件下生成纯合子K18-hACE2-Tg/Tg小鼠的菌落。F1选用10只6-8周龄的半细胞小鼠(7只雌性，3只雄性)，来自美国杰克逊实验室。通过PCR基因分型鉴定出78只动物，其中半细胞62只(Tg/0)，野生细胞16只(0/0)。将转基因动物与C57BL/6J小鼠杂交，选择F2中产生100%半合子的纯合子亲本。从224只幼崽中获得7只纯合子亲本K18-hACE2-Tg/Tg，用于纯合子K18-hACE2-Tg/Tg小鼠的基础群体。在本研究中，我们研究了一种名为K18-hACE2-Tg/Tg的小鼠模型，该模型可用于研究SARS-CoV-2的发病机制和可能的治疗方法。

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