Método de cuantificación enzimática con DNS para ß-mananasa en soya y en un aditivo nutricional

Abstract

En la búsqueda de la disminución del uso de antibióticos en la alimentación animal se destaca el desarrollo de aditivos nutricionales que promueven la salud animal y el mejor aprovechamiento de nutrientes en alimentos de origen vegetal. En este trabajo se desarrolló un método analítico para cuantificar la actividad de la enzima endo-β-mananasa en un aditivo nutricional comercial y en la soya comúnmente usada como fuente de alimento para cerdos y pollos. El método usado se basa en la determinación de azúcares reductores con ácido 3,5-dinitrosalicílico complementado con espectroscopia ultravioleta, donde mediante una curva de calibración de manosa se logra determinar la cantidad de azúcares liberados por una unidad equivalente de enzima (U) en la materia prima, en un aditivo nutricional comercial y cuando es adicionado a la soya. Adicionalmente, se hizo la determinación de la actividad enzimática por el método de cromatografía liquida con detector infrarrojo, se pudo identificar la señal del estándar de monosacárido manosa, pero no se logró la separación, identificación y posterior cuantificación de los azucares reductores producidos o liberados por la actividad de la enzima en la matriz del alimento. En este trabajo se desarrolló un método analítico para cuantificar la actividad de la enzima endo-β-mananasa en un aditivo nutricional comercial y en la soya comúnmente usada como fuente de alimento para cerdos y pollos. El método usado se basa en la determinación de azúcares reductores con ácido 3,5-dinitrosalicilico complementado con espectroscopia ultravioleta, donde mediante una curva de calibración de manosa se logra determinar la cantidad de azúcares liberados por una unidad equivalente de enzima (U) en la materia prima, en un aditivo nutricional comercial y cuando es adicionado a la soya. Adicionalmente, se hizo la determinación de la actividad enzimática por el método de cromatografía liquida con detector infrarrojo, se pudo identificar la señal del estándar de monosacárido manosa, pero no se logró la separación, identificación y posterior cuantificación de los azucares reductores producidos o liberados por la actividad de la enzima en la matriz del alimento.