Identificación fenotípica y molecular de Burkholderia spp en panículas de arroz (Oryza sativa L.)

Dagne Valeria Fornos Reyes, Norvin Josué Peralta Herrera, Isaías Ezequiel Sánchez Gómez, Markelyn José Rodríguez Zamora
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Abstract

La enfermedad conocida como Añublo bacteriano del arroz es causado por Burkholderia glumae, Burkholderia gladiolii y el Tizón de las plántulas de arroz causado por Burkholderia plantarii, son bacterias consideradas de importancia en el cultivo del arroz (Oryza sativa L.).  Las afectaciones han aumentado en los últimos años causando grandes pérdidas económicas anuales en los países productores de este grano. El objetivo de esta investigación fue identificar mediante pruebas fenotípicas y molecular, especies de Burkholderia en panículas de arroz (Oryza sativa L.). La colecta de muestras se realizó en el municipio de Sébaco, Matagalpa en el Centro experimental TAI-NIC y Finca Virginia, también en la empresa Agrícola Miramontes del departamento de Boaco y Finca la Doña, municipio de Malacatoya, Granada. Las bacterias fueron aisladas a partir de panículas con síntomas de la enfermedad y la identificación de especies se realizó mediante pruebas bioquímicas (diferenciación y carbohidratos). La confirmación de las especies de Burkholderia se realizó mediante la técnica molecular PCR (Reacción en cadena de la polimerasa). Los aislados de B. gladiolii en el medio King B presento colonias blancas grisáceas o amarillenta, produce el pigmento amarillo difuso no fluorescente, mientras B. plantarii mostraron colonias amarillas, traslucidas y convexas, no fluorescentes, para el caso de B. cepacia las colonias fueron traslucidas, convexas no fluorescentes. La identificación con pruebas bioquímicas demostró la presencia de 18 aislados positivos para B. gladiolii, dos aislados para B. plantarii y uno positivo a B. cepacia. Con la técnica PCR se identificaron 18 muestras positivas para B. gladiolii que amplificaron fragmentos de 479 pares de base y dos muestras positivas a B. plantarii con fragmentos de 597 pares de base, para el caso de B. glumae no fue identificada mediante prueba fenotípicas, ni molecular.
由glumae伯克霍氏菌、gladiolii伯克霍氏菌和植物伯克霍氏菌引起的水稻幼苗枯萎病被认为是水稻栽培中的重要细菌(Oryza sativa L.)。近年来,这种影响有所增加,每年给这种谷物的生产国造成巨大的经济损失。本研究的目的是通过表型和分子试验鉴定水稻穗(Oryza sativa L.)中伯克霍氏菌的种类。本研究的目的是确定在本研究中使用的方法,并确定在本研究中使用的方法,以及在本研究中使用的方法。从有疾病症状的圆锥花序中分离出细菌,并通过生化试验(分化和碳水化合物)进行物种鉴定。本研究的目的是确定伯克霍尔德菌的种类,并对其进行鉴定。在King B培养基中分离的gladiolii菌落呈灰白色或黄色,产生不荧光的弥漫性黄色色素,而plantarii菌落呈黄色、半透明和凸状,不荧光;cepacia菌落呈半透明、凸状,不荧光。生化鉴定结果显示剑兰芽孢杆菌18株阳性,植物芽孢杆菌2株阳性,洋葱芽孢杆菌1株阳性。利用PCR技术鉴定了18份剑兰芽孢杆菌阳性标本,扩增了479个碱基对的片段,2份植物芽孢杆菌阳性标本,扩增了597个碱基对的片段,而glumae芽孢杆菌未通过表型和分子检测鉴定。
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