耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌碳青霉烯类酶的表型和基因型研究。

肺炎克雷伯菌的碳青霉烯耐药主要是由碳青霉烯酶产生介导的。本研究旨在利用多重聚合酶链式反应（PCR）鉴定耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分离株碳青霉烯酶基因，并评价联合圆盘法（CDA）作为表型检测方法的性能。对123株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌进行了分析。用肉汤微量稀释法测定粘菌素和美罗培南的敏感性，用圆盘扩散法测定头孢他啶-阿维巴坦的敏感性。采用多重PCR检测5个常见碳青霉烯酶基因blaOXA-48、blaNDM、blaKPC、blaIMP、blaVIM。CDA采用美罗培南和替莫西林圆盘联合特异性抑制剂（EDTA、硼酸、氯西林）。粘菌素（59.3%）和头孢他啶-阿维巴坦（58.5%）的易感率最高。PCR检出blaOXA-48的阳性率为53.6%，blaKPC的阳性率为45.5%，blaNDM的阳性率为32.5%。CDA分别在44.7%、44.7%和10.6%的分离株中检测到MBL、KPC和OXA-48酶，在NDM存在时未能检测到OXA-48。与PCR相比，CDA对KPC检测的一致性极好（灵敏度100%，特异性100%，κ = 0.984），对MBL检测的一致性中等（灵敏度95%，特异性76.1%,κ = 0.679），对OXA-48检测的一致性较差（灵敏度19.7%，特异性100%，κ = 0.185）。CDA可作为检测产生kpc的分离株的初始表型筛选工具；然而，其检测OXA-48和碳青霉烯酶共同产生的能力有限，限制了其在更广泛临床解释中的可靠性。因此，基于pcr的方法对于准确的确认和监测仍然至关重要。